詳細介紹
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
禽傳染性支氣管炎病毒荷蘭株PCR檢測試劑盒 | Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)RTPCR | 50T |
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉離心30 分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
定量PCR方法:
熒光定量PCR探針法 | 熒光定量PCR SYBR Green染料法 | 快速PCR | 多重 PCR |
探針法即除了引物外另外設置一個探針,在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團和淬滅集團,,這個時候,,兩個平衡不發(fā)光,但是當DNA通過引物合成的時候,,探針被折斷,,釋放出發(fā)光集團和淬滅集團,兩個距離較遠,,發(fā)光集團產(chǎn)生熒光,,被機器收集到信號,從而檢測基因的量 | 染料能夠與雙鏈結合,,當PCR擴增的時候,,染料結合到DNA上,從而發(fā)光,,單個的染料不發(fā)光,,這樣就能收集到信號,我們可以看出,,染料法特異性不強,,只要是雙鏈的DNA都回結合發(fā)光。 | 在快速PCR中,通過縮減PCR步驟所需時間來完成更快的擴增,,且不會影響擴增產(chǎn)量和效率,。快速循環(huán)條件尤其適用于具有高擴增能力的DNA聚合酶,,這類聚合酶在每個結合中可引入更多的核苷酸,。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時間的1/2至1/3,卻能維持較高的擴增效率,。此外,,如果引物的退火和延伸溫度相差無幾,則可將它們合并為一步,,以進一步縮短PCR時間,。這一過程也被稱為 兩步PCR法。 | 多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定,。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,,進行PCR擴增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染,。 |
相關產(chǎn)品:
利什曼原蟲通用PCR檢測試劑盒
熱帶利什曼原蟲PCR檢測試劑盒
同豬生殖與呼吸綜合癥病毒歐洲株PCR檢測試劑盒
通用PCR檢測試劑盒
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度
Goat Anti-Guinea IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
FAM123B: 腎母細胞瘤X蛋白抗體 0.2ml
成骨特異性轉錄因子抗體 Anti-CBFA1/RUNX2 0.1ml
Anti-Notch3/FITC 熒光素標記跨膜受體蛋白Notch-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh POC5 細胞中心粒蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-TORC1/CRTC1/FITC 熒光素標記環(huán)腺苷酸應答元件結合蛋白轉錄共激活因子TORC1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠周期素依賴性抑制因子2A(CDKN2A)ELISA試劑盒 ,英文名: CDKN2A ELISA Kit
犬雙氫睪酮(DHT)ELISA檢測試劑盒CanineDihydrotestosterone,DHTELISAKit 96T/48T
犬透明質酸酶2(HAase 2)免疫試劑盒 Canine Hyaluronidase 2,HAase 2 ELISA Kit
英文名稱HumaumornecrosisfactorβELISAKIT人腫瘤壞死因子β(TNFβ)規(guī)格:96T/48T
超氧化物歧化酶(SOD)酵母/真菌裂解樣品制備試劑盒50次
RatgranzymesB,Gzms-BELISA試劑盒大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
禽傳染性支氣管炎病毒荷蘭株PCR檢測試劑盒2-Amino-4-methylbenzothiazole 1477-42-5 中文名:2-氨基-4-并噻唑 分子式:C8H8N2S 度:98.0% 小鼠環(huán)0酸鳥苷 英文名稱: cyclic adenosine monophosphate 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: cGMP
2-Amino-4'-fluorobenzophenone 3800/6/4 中文名: 分子式:C13H10FNO 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子 英文名稱: ciliary neuroophic factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CF
2-Amino-4-chlorobenzothiazole 19952-47-7 中文名:2-氨基-4-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S 度:98.0% 關鍵詞: 白細胞分化抗原14 英文名稱: cluster of differeiation aigen 14 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CD14
2-Amino-3-methylbenzoic acid 4389-45-1 中文名:2-氨基-3-甲酸 分子式:C8H9NO2 度:98.0% 可溶性細胞表面分化抗原40配體 英文名稱: Soluble Cluster of differeiation aigen 40 ligand 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: sCD40L
2-Amino-3-hydroxyanthraquinone 117-77-1 中文名:2-氨基-3-羥基蒽醌 分子式:C14H9NO3 度:98.0% 小鼠Aelisa試劑盒 小鼠A試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠A試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠A試劑盒,、小鼠Aeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月,。
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例),。由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。
1. 標記 6 個離心管,,分別為 7,6,,5,4,,3,,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,,*用帶芯槍頭,,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,,試劑盒提供),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用,。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用。
5. 換槍頭,,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用,。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用,。
二,、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容,。
8. 如果有 N 個樣品,,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管,、另一個用作樣品制備陰性對照管,。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),,6 個用于標準曲線。如果做定性分析,,并且只做 1 次重復,,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),,1 個用于PCR 陽性對照。