詳細介紹
產品屬性:
產品名稱:桿菌屬通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Brucella spp.PCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復凍融,。
運輸:低溫,、避光,,快遞免費送貨上門,。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3.細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
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PCR實驗方法步驟:
方法1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer5 μl dNTP mix
(2mM)4 μl
引物1(10pM)2 μl
引物2(10pM)2 μl Taq
酶 (2U/μl)1 μl DNA
模板(50ng-1μg/μl)1 μl
加ddH2O至 50 μl
實驗過程:
一,、試劑準備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2 .對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,,而不能從無到有,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設計的引物,。可以是DNA也可以是RNA,,一般20多bp,,需要根據你的模板鏈設計。因此,,擴增不同的基因需要設計不同的引物)3 .10×PCR Buffer4 .2mM dNTPmix:含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM5 .Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl Taq 酶(2U/μl) 1μlDNA 模板(50ng-1μg/μl)???1 μl |
2.調整好反應程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結束反應,,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測,。
IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的驢抗羊IgG 0.1ml
FOXRED2: FOXRED2蛋白抗體 0.2ml
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Anti-Phospho-FAK (Tyr576/577) /FITC 熒光素標記兔抗人、大,、小鼠0酸化粘著斑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Syk (Tyr525/526) 0酸化非受體型酪蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
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RatIerleukin11,IL-11ELISA試劑盒大鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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注意事項:
①加入試劑的順序應一致,,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),,避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,,使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質前使用,。