詳細(xì)介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:雞傳染性貧血病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Chicken Infectious Anemia Virus(CIAV)PCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
運輸:低溫、避光,,快遞免費送貨上門,。
相關(guān)產(chǎn)品:
致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒
中華鱘特定基因序列PCR檢測試劑盒
豬、牛,、羊布魯氏菌病PCR檢測試劑盒
豬布氏桿菌PCR檢測試劑盒
實驗過程:
一,、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
FBXO4: FBXO4蛋白抗體 0.2ml
EB病毒編碼核蛋白-3抗體 Anti-EBNA-3 0.1ml
Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1021)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化血小板源性生長因子受體-B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Tie2 (Tyr992) 0酸化血管生成素受體2抗體 規(guī)格 0.1ml
IgM/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗小鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒 ,,英文名: IGFBP-2 ELISA Kit
小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA檢測試劑盒MouseAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit 96T/48T
人甲狀腺素抗體(TAb)免疫試劑盒 Human Thyroid Aibody,TAb ELISA Kit
RatAzidothymidine,AZTELISAKit大鼠(AZT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組蛋白H4-K16乙?;瘷z測試劑盒10/20次等
Mouseai-zonapellucidaaibody,aZPELISA試劑盒小鼠抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雞傳染性貧血病毒PCR檢測試劑盒GAD-67 (glutamate decarboxylase 67) 谷脫羧酶-67抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CLEC7A Dectin-1 / CLEC7A 兔單抗 (PE) Mouse
Rhesus antibody Rh phospho-DDX58 (Ser8) 0酸化DDX58抗體 規(guī)格 0.1ml
纖維素膜(15×60cm 0.45um) 1張 Pall-Gelman
ZNF312 英文名稱: 鋅指蛋白312抗體 0.1ml
DCIR/CLEC4A 英文名稱: C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體 0.2ml
CLEC7A Dectin-1 / CLEC7A 兔單抗 (PE) Mouse
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。