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破傷風(fēng)梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-03-15 13:10:06瀏覽次數(shù):163

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 用于科研
英文名稱 Clostridium tetaniPCR 儲存條件 -20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融
分類 PCR檢測試劑盒    
破傷風(fēng)梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:犬布魯氏桿菌PCR檢測試劑盒
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詳細介紹

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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:破傷風(fēng)梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒
英文名稱:Clostridium tetaniPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20
避光保存,,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫,、避光,,快遞免費送貨上門。

5.png

儲存條件:
僅用于科研14或-20樣品收集,、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3.
細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5.
保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20
,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl    
引物110pM
2 μl    
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl      
ddH2O 50 μl
實驗過程:

一、試劑準(zhǔn)備

二,、操作步驟

1. DNA模板
  2
.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允?span>DNA
也可以是RNA,,一般20bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
  3
10×PCR Buffer
  4
2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP,、dGTP,、dTTP2mM
  5
Taq

1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
  10×PCR buffer             5μl
  dNTP mixl                 4μl
 
引物110pM               2μl
 
引物210PM              2μl
  Taq
酶(2U/μl              1μl
        DNA
模板(50ng-1μg/μl
???1   μl
 
ddH2O                 50 μl
 
PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
 
 

2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93預(yù)變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72 保溫7min,。
3
.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4
待電泳檢測或-20保存,。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項:
加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。

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