詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:腸出血性大腸桿菌血清型PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Enterohemorrhagic E. coli(EHEC)O157PCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫,、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
相關(guān)產(chǎn)品:
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實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一,、試劑準(zhǔn)備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存,。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
MOP5: 單核細(xì)胞蛋白5抗體 0.2ml
phospho-EPB41 (Tyr418 + Tyr660): 0酸化紅細(xì)胞膜條帶4.1蛋白抗體 0.1ml
腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體 Anti-ABCA1 0.1ml
Anti-WNT5A/FITC 熒光素標(biāo)記信號(hào)通路Wnt5a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32) 0酸化叉頭蛋白家族抗體 規(guī)格 0.1ml
CNTF(Ciliary Neurotrophic Factor) 睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR3)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR3 ELISA Kit
兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitneuroophin3,-3ELISAKit 96T/48T
犬KI-67抗原(MKI67)免疫試劑盒 Dog aigen KI-67,MKI67 ELISA kit
英文名稱Huma3ELISAKit人狀腺原(T3)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
蛋白變性液10毫升
RatmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1ⅠELISA試劑盒大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
腸出血性大腸桿菌血清型PCR檢測(cè)試劑盒Integrin alpha V/CD51 peptide 整合素αV抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-ADRB2 能受體β2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CD151/MER2(Ser30) 0酸化CD151抗體 規(guī)格 0.1ml
單組分ABTS染色液 100ml/500ml 用于ELISA,405nm
VLDL Receptor 英文名稱: 極低密度脂蛋白受體抗體 0.1ml
DNAJA2 英文名稱: 細(xì)胞周期蛋白3抗體 0.2ml
Anti-ADRB2 能受體β2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。