詳細介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:捻轉(zhuǎn)血矛線蟲PCR檢測試劑盒
英文名稱:Haemonchus contortusPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫,、避光,,快遞免費送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
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實驗過程:
一,、試劑準(zhǔn)備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
Rabbit Anti-IgG/Bio 標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml
FARSLA/CML33: 慢性粒細胞白血病33抗體 0.2ml
C-藻藍素/藻藍蛋白抗體 Anti-C-PC 0.1ml
Anti-p53BP1/53BP1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠p53結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PI3 Kinase p110 delta 0脂酰肌醇催化亞單位D抗體 規(guī)格 0.1ml
IgM/ Biotin 化小鼠抗羊IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
小鼠纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1)ELISA試劑盒 ,,英文名: PAI-1 ELISA Kit
小鼠降鈣素原(PCT)ELISA檢測試劑盒MouseProcalcitonin,PCTELISAKit 96T/48T
人黑色素細胞抗體(MC Ab)免疫試劑盒 Human melanocyte aibody,MC Ab ELISA Kit
Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3’末端DNA探針同位素([α32P]dATP)轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記試劑盒20次
MouseCytochrome-C,Cyt-CELISA試劑盒小鼠(Cyt-C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
捻轉(zhuǎn)血矛線蟲PCR檢測試劑盒PEG10(Paternally expressed gene 10) 肝癌高表達基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-phospho-ATR/ACTR(Ser428) 0酸化ATR抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491) 0酸化腺苷單0酸活化蛋白α1抗體 規(guī)格 0.1ml
p16INK4a 濃縮液 0.1ml 進口分裝
USP1 英文名稱: 泛素特異性1抗體 0.2ml
DNA Polymerase beta 英文名稱: DNA聚合酶β抗體 0.2ml
Anti-phospho-ATR/ACTR(Ser428) 0酸化ATR抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。