大腸桿菌TG1化學感受態(tài)細胞是大腸桿菌 BL21（DE3）plysS 菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,，可用于DNA 的熱擊轉(zhuǎn)化。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測本產(chǎn)品,，轉(zhuǎn)化效率可達 107,。該菌株帶有質(zhì)粒plysS，具有氯霉素抗性,，此質(zhì)粒含有表達 T7 溶菌酶的基因,，T7 溶菌酶能夠降低目的基因的背景表達水平，但不干擾 IPTG 誘導(dǎo)的表達

產(chǎn)品及特點

大腸桿菌TG1化學感受態(tài)細胞是采用大腸桿菌 Origami B (DE3)菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,，可用于 DNA 的化學轉(zhuǎn)化,。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測本產(chǎn)品，轉(zhuǎn)化效率可達 107,。本感受態(tài)細胞具有卡那霉素和四環(huán)素抗性,。
菌株基因型為：F-ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10trxB (KanR,TetR)
規(guī)格及成分 成分 編號 包裝
本產(chǎn)品 120520 0.1 mL×10
使用手冊 1 份

運輸及保存 干冰運輸、-80℃保存,，有效期半年,。
自備試劑 目的 DNA、SOC 或 LB 培養(yǎng)基等
大腸桿菌TG1化學感受態(tài)細胞使用方法 1. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中,。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為 50-100μL,，可以根據(jù)
實際情況分裝使用。
以下實驗以 50 μL 感受態(tài)細胞為例,。
2. 待感受態(tài)細胞融化后,，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的 DNA（根據(jù)實際情況加入適量
的 DNA，通常 100 μL 感受態(tài)細胞能夠被 1 ng 超螺旋質(zhì)粒 DNA 所飽和）,，用移液器
輕輕吹打混勻,，冰浴 30 分鐘。
3. 42℃熱擊 45 秒,，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,，冰上靜置 2-3 分鐘。
4. 每個離心管中加入 450 μL 無菌的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基（不含抗生素）,，混勻后置于 37℃
搖床,，150 rpm 振蕩培養(yǎng) 45 分鐘使菌體復(fù)蘇,。
5. 根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞,，加到含相應(yīng)抗生素的 SOC 或 LB 固體
瓊脂培養(yǎng)基上,，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于 37℃直至液體被吸收,，
倒置培養(yǎng),，37℃培養(yǎng) 12-16 小時。
注意：
1. 涂布用量可根據(jù)具體實驗調(diào)整,。若轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較多,，可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；
若轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較少,，可取 200-300 μL 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板,。若預(yù)計的克隆數(shù)較
少，可通過離心（4,000 rpm,，2 分鐘）后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于
平板中,。
2. 新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干,，可將平板正置于 37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
3. 涂布剩余的菌液可置于 4℃保存,，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少,，可以將剩下的菌液再
涂布新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
關(guān)聯(lián)產(chǎn)品 Origami B (DE3) plysS 感受態(tài)細胞（CAT#:130556）