1.產(chǎn)品名稱：大鼠食管上皮細(xì)胞
2.組織來源：食管組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介：
大鼠食管上皮細(xì)胞分離自食管組織,；食管是咽和胃之間的消化管,，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降,，而逐漸增長,。食管可分為頸段、胸段和腹段,。脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,，腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中,，食管的上皮細(xì)胞增殖,，由單層變?yōu)閺?fù)層，食管使管腔變狹窄,，甚至一度閉鎖,，以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層,、黏膜下層,、肌層和外膜。其中,，黏膜層,，包括上皮、固有層和黏膜肌層,。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮,，耐摩擦，有保護(hù)作用,。在食管與胃賁門交界處,，復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的,、無角化,、潮濕的復(fù)層扁平上皮細(xì)胞覆蓋，其頂端細(xì)胞膜和細(xì)胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障,，防止食管內(nèi)容物的滲入,。特別的是，層屏障使表層細(xì)胞的基質(zhì)外側(cè)細(xì)胞膜和深層細(xì)胞的全部細(xì)胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動(dòng)的滲透壓之下,。從組織學(xué)上講,，食管上皮由兩層組成，基底層和分化層,；其中,，僅基底層的細(xì)胞可以增殖,，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標(biāo)記的依序表達(dá),。食管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機(jī)制和食管癌變機(jī)制的非常好的體外模型,。
本公司生產(chǎn)的采用機(jī)械分離法結(jié)合組織貼塊法，并通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,；細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息：
M199,、FBS、上皮細(xì)胞生長添加劑,、Hydrocortisone,、Insulin、Transferrin,、Epinephrine,、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號(hào)：CM-R027）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。
T25瓶細(xì)胞處理方法
收到細(xì)胞后,，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,。如有破損漏液等問題,，請即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：
1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部,。
2.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3.預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清,，1%雙抗）,。
4.顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）,。
5.①若細(xì)胞密度較小,，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基,。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng),。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代,。
②若細(xì)胞密度較大，達(dá)到80%以上,，將細(xì)胞傳代培養(yǎng),。
注：
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%，建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基,。由于運(yùn)輸過程中的問題,，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,，這時(shí)請?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,。（這里是針對(duì)原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,，如果原來FBS濃度是20%，可以增加到25%FBS濃度）   收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,，煩請當(dāng)天盡快聯(lián)系并提供圖片,，以便售后處理。7天內(nèi)反饋,，細(xì)胞本身問題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理,；7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格，不予免費(fèi)售后