1.產(chǎn)品名稱：大鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞
2.組織來(lái)源：肺組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞分離自肺組織,；肺泡由單層上皮細(xì)胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無(wú)數(shù)細(xì)支氣管,，它們的末端膨大成囊,，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡,。小肺泡細(xì)胞,，又稱I型肺泡細(xì)胞，厚約0.1微米,，基底部是基底膜,，無(wú)增殖能力。大肺泡細(xì)胞,，又稱Ⅱ型肺泡細(xì)胞,，分泌表面活性物質(zhì)（二棕櫚酰卵磷脂），以降低肺泡表面張力,。Ⅱ型肺泡細(xì)胞位于Ⅰ型肺泡細(xì)胞之間,，數(shù)量較Ⅰ型肺泡細(xì)胞多，但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細(xì)胞小,。細(xì)胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔,。細(xì)胞核圓形，胞質(zhì)著色淺,、呈泡沫狀,。電鏡下，細(xì)胞游離而有少量微絨毛,，胞質(zhì)內(nèi)富含線粒體和溶酶體,，有較發(fā)達(dá)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體。核上方有較多的分泌顆粒,，電子密度高,、大小不等,，直徑約0.1-1.0μm顆粒內(nèi)含有平行排列的板層狀結(jié)構(gòu)，稱為嗜餓性板層小體,。小體內(nèi)的主要成分為磷脂,，以二棕櫚酰卵磷脂為主，此外還有糖胺多糖及蛋白質(zhì)等,。顆粒內(nèi)物質(zhì)釋放出來(lái)后,，在肺泡表面形成一層粘液層，稱為表面活性物質(zhì)（surfactant）,。表面活性物質(zhì)有降低肺泡表面張力,、穩(wěn)定肺泡大小的作用。呼氣時(shí)肺泡縮小,，表面活性物質(zhì)密度增加,，表面張力降低，防止肺泡過(guò)度塌陷,；吸氣時(shí)肺泡擴(kuò)張,，表面活性物質(zhì)密度減小，肺泡回縮力加大,，可防止肺泡過(guò)度膨脹,。表面活性物質(zhì)的缺乏或變性均可引起肺不張，過(guò)度通氣可造成表面活性物質(zhì)缺乏,；吸入毒氣可直接破壞表面活性物質(zhì),。Ⅱ型肺泡細(xì)胞有分裂、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細(xì)胞的潛能,，故具有修復(fù)受損傷上皮的作用,。
本公司生產(chǎn)的采用胰蛋白酶-膠原酶混合灌注消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,；細(xì)胞經(jīng)SP-C免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息：
M199、FBS,、上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑,、Hydrocortisone,、Insulin、Transferrin,、Epinephrine,、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號(hào)：CM-R003）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。
T25瓶細(xì)胞處理方法
收到細(xì)胞后,，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,。如有破損漏液等問(wèn)題,，請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：
1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部,。
2.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3.預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清,，1%雙抗）,。
4.顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）,。
5.①若細(xì)胞密度較小,，無(wú)菌操作，去掉培養(yǎng)基,。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基,。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,，進(jìn)行傳代,。
②若細(xì)胞密度較大，達(dá)到80%以上,，將細(xì)胞傳代培養(yǎng),。
注：
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%，建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基,。由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,，這時(shí)請(qǐng)?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,。（這里是針對(duì)原來(lái)*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,，如果原來(lái)FBS濃度是20%，可以增加到25%FBS濃度）   收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題,，煩請(qǐng)當(dāng)天盡快聯(lián)系并提供圖片,，以便售后處理,。7天內(nèi)反饋，細(xì)胞本身問(wèn)題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理,；7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,，不予免費(fèi)售后