詳細(xì)介紹
1.產(chǎn)品名稱:大鼠胚肺成纖維細(xì)胞
2.組織來源:胚肺組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介:
大鼠胚肺成纖維細(xì)胞分離自胚肺組織,;肺是機(jī)體的呼吸器官,,位于胸腔,左右各一,,覆蓋于心之上,。肺有分葉,左二右三,,共五葉,。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉,、鼻相連,,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅,。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,,在一定條件下,,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的胚肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁*,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,散在生長,,不聚集成團(tuán),;細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),,細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,平坦,、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。該細(xì)胞在合成和分泌細(xì)胞因子,、維持血管內(nèi)外和凝血和纖溶的的動態(tài)平衡中起重要作用。
本公司生產(chǎn)的采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,;細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM[H],、FBS、成纖維細(xì)胞生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:CM-R174)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
T25瓶細(xì)胞處理方法
收到細(xì)胞后,,檢查外包裝是否完整,,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,,請即時(shí)聯(lián)系,。并進(jìn)行以下操作:
1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3.預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗),。
4.顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5.①若細(xì)胞密度較小,,無菌操作,,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基,。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng),。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代,。
②若細(xì)胞密度較大,,達(dá)到80%以上,將細(xì)胞傳代培養(yǎng),。
注:
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基。由于運(yùn)輸過程中的問題,,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,,這時(shí)請?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天,;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,。(這里是針對原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,,可以增加到25%FBS濃度) 收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,,煩請當(dāng)天盡快聯(lián)系并提供圖片,以便售后處理,。7天內(nèi)反饋,,細(xì)胞本身問題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,,不予免費(fèi)售后