大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞采用先用胰蛋白酶短時(shí)間消化,、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來(lái),，細(xì)胞總量T25瓶；細(xì)胞經(jīng)堿性磷酸酶染色和茜素紅染色鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

1.產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞
2.組織來(lái)源：結(jié)腸組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞分離自結(jié)腸組織；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,，在第3骶椎平面連接直腸,。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸,、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分,，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M”，將小腸包圍在內(nèi),。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層,、固有層、黏膜肌層）,，黏膜下層（疏松結(jié)締組織）,，肌層（內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑?。?，外膜（纖維膜或漿膜）。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,，持續(xù)暴露于大量抗原中,，也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的*道防線。因此,，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收,、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用,。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生,、性質(zhì)和強(qiáng)度,。探討正常結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞的分離、體外培養(yǎng)方法,，為研究腸黏膜上皮細(xì)胞以及與腸黏膜相關(guān)疾病建立合適的細(xì)胞模型,。
本公司生產(chǎn)的采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過(guò)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,；細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18/PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息：
M199,、FBS、上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑,、Hydrocortisone,、Insulin,、Transferrin、Epinephrine,、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號(hào)：CM-R170）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
T25瓶細(xì)胞處理方法
收到細(xì)胞后,，檢查外包裝是否完整,，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問(wèn)題,，請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系,。并進(jìn)行以下操作：
1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3.預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清,，1%雙抗）,。
4.顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）,。
5.①若細(xì)胞密度較小,，無(wú)菌操作，去掉培養(yǎng)基,。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基,。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,，進(jìn)行傳代,。
②若細(xì)胞密度較大，達(dá)到80%以上,，將細(xì)胞傳代培養(yǎng),。
注：
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%，建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基,。由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,，這時(shí)請(qǐng)?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,。（這里是針對(duì)原來(lái)*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,，如果原來(lái)FBS濃度是20%，可以增加到25%FBS濃度）   收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題,，煩請(qǐng)當(dāng)天盡快聯(lián)系并提供圖片,，以便售后處理,。7天內(nèi)反饋，細(xì)胞本身問(wèn)題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理,；7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,，不予免費(fèi)售后