詳細(xì)介紹
1.產(chǎn)品名稱:大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞
2.組織來源:眼角膜組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,,約占纖維膜的前1/6,,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形,。角膜厚度各部分不盡相同,,中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,,如有外物接觸角膜,,眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明,,角膜并沒有血管,,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣,。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層,、前彈力層,、基質(zhì)層、后彈力層,、內(nèi)皮細(xì)胞層,。角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分,占據(jù)角膜厚度的90%,,由角膜基質(zhì)細(xì)胞,、膠原纖維和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成。角膜基質(zhì)層缺損的修復(fù)主要由角膜基質(zhì)細(xì)胞的增殖及分泌細(xì)胞外基質(zhì)完成,。角膜基質(zhì)層具有結(jié)構(gòu)規(guī)整,,透明度高的特點(diǎn),,正常情況下角膜基質(zhì)細(xì)胞分泌組成基質(zhì)層的成分,維持角膜的透明度,,此細(xì)胞對(duì)于角膜損傷的修復(fù)具有重要意義,。角膜基質(zhì)細(xì)胞,存在于角膜基質(zhì)層中,,在正常情況下,,處于靜止?fàn)顟B(tài)。但當(dāng)角膜損傷時(shí),,不同上皮來源的因子及環(huán)境信號(hào),,將影響角膜基質(zhì)細(xì)胞的應(yīng)答反應(yīng),決定著角膜能否*被修復(fù),。
本公司生產(chǎn)的采用膠原酶消化后組織貼塊法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM[H]、FBS,、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):CM-R168)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
T25瓶細(xì)胞處理方法
收到細(xì)胞后,,檢查外包裝是否完整,,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,,請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系,。并進(jìn)行以下操作:
1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3.預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗),。
4.顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5.①若細(xì)胞密度較小,無菌操作,,去掉培養(yǎng)基,。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng),。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,,進(jìn)行傳代。
②若細(xì)胞密度較大,,達(dá)到80%以上,,將細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
注:
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基,。由于運(yùn)輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,,這時(shí)請(qǐng)?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天,;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,。(這里是針對(duì)原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,,可以增加到25%FBS濃度) 收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,,煩請(qǐng)當(dāng)天盡快聯(lián)系并提供圖片,以便售后處理,。7天內(nèi)反饋,,細(xì)胞本身問題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,,不予免費(fèi)售后