1.產(chǎn)品名稱：大鼠角膜成纖維細胞
2.組織來源：眼角膜組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
大鼠角膜成纖維細胞分離自眼角膜組織,；角膜位于眼球前壁的一層透明膜,，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形,，從前面看為橫橢圓形,。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄,。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛,。為了保持透明,，角膜并沒有血管，透過外界空氣,、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣,。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層,、前彈力層,、基質(zhì)層、后彈力層,、內(nèi)皮細胞層,。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下,，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的角膜成纖維細胞呈圓形,、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細胞基本貼壁*,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長，不聚集成團,；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長,，平坦、胞體較大,，細胞質(zhì)透明,，細胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。角膜成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持角膜的正常形態(tài),，合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。
本公司生產(chǎn)的采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10^5cells/瓶,；細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM[H],、FBS、成纖維細胞生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：CM-R123）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
T25瓶細胞處理方法
收到細胞后,，檢查外包裝是否完整,，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,，請即時,。并進行以下操作：
1.75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。
2.將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
3.預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）,。
4.顯微鏡觀察細胞生長情況,，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。
5.①若細胞密度較小,，無菌操作,，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基,。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng),。待細胞密度達到80%以上，進行傳代,。
②若細胞密度較大,，達到80%以上，將細胞傳代培養(yǎng)。
注：
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,，建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基,。由于運輸過程中的問題，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,，這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天,；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,。（這里是針對原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況，如果原來FBS濃度是20%,，可以增加到25%FBS濃度）   收到細胞后如細胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,，煩請當(dāng)天盡快并提供圖片，以便售后處理,。7天內(nèi)反饋,，細胞本身問題免費重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實際情況酌情處理；7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,，不予免費售后