詳細(xì)介紹
1.產(chǎn)品名稱:大鼠小腦顆粒細(xì)胞
2.組織來源:小腦組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠小腦顆粒細(xì)胞分離自小腦皮層組織;神經(jīng)元是神經(jīng)系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)與功能單位,,小腦顆粒神經(jīng)元是體積較小的神經(jīng)元,,直徑約10μm,,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含量非常豐富,近乎神經(jīng)元數(shù)量的一半,。由于小腦神經(jīng)元的生長(zhǎng),、分化和大腦皮層神經(jīng)元相似,而且數(shù)量多,、便于取材,,因此小腦顆粒神經(jīng)元是研究神經(jīng)元生長(zhǎng)發(fā)育、神經(jīng)軸突再生及神經(jīng)疾病發(fā)生機(jī)制和臨床神經(jīng)藥理的重要手段,。小腦顆粒神經(jīng)元是小腦主要的中間神經(jīng)元,,在哺乳動(dòng)物的小腦內(nèi)數(shù)量為豐富。顆粒神經(jīng)元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相,,形成小腦皮層內(nèi)的神經(jīng)元環(huán)路,,在小腦的神經(jīng)活動(dòng)中起著非常重要的作用。在動(dòng)物傳染性海綿狀腦病中,,病變可波及小腦顆粒神經(jīng)元,,導(dǎo)致小腦皮層的神經(jīng)元環(huán)路受損,從而呈現(xiàn)神經(jīng)性行為失調(diào),。研究小腦顆粒神經(jīng)元在動(dòng)物傳染性海綿狀腦病病理學(xué)變化中的反應(yīng),、病理發(fā)生的機(jī)理特別是分子機(jī)理,有賴于小腦顆粒神經(jīng)元細(xì)胞模型的建立,。小腦顆粒細(xì)胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維,,正是這種排列保證了興奮的單向傳導(dǎo),這是小腦功能理論中的關(guān)鍵假設(shè),,小腦顆粒細(xì)胞通過g-氨基丁酸接受戈?duì)柤?xì)胞的抑制性突觸的信息傳入,。
本公司生產(chǎn)的采用胰蛋白酶消化法結(jié)合神經(jīng)元培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,;細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin/MAP-2免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息:
Neurobasal-A,、B-27、Penicillin,、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):CM-R112)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。
T25瓶細(xì)胞處理方法
收到細(xì)胞后,,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,。如有破損漏液等問題,,請(qǐng)即時(shí)。并進(jìn)行以下操作:
1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部,。
2.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3.預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,,1%雙抗)。
4.顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張),。
5.①若細(xì)胞密度較小,無菌操作,,去掉培養(yǎng)基,。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng),。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,,進(jìn)行傳代。
②若細(xì)胞密度較大,,達(dá)到80%以上,,將細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
注:
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基,。由于運(yùn)輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,,這時(shí)請(qǐng)?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天,;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,。(這里是針對(duì)原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,,可以增加到25%FBS濃度) 收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,,煩請(qǐng)當(dāng)天盡快并提供圖片,以便售后處理,。7天內(nèi)反饋,,細(xì)胞本身問題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,,不予免費(fèi)售后