詳細(xì)介紹
1.產(chǎn)品名稱:大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
2.組織來(lái)源:腦組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腦組織,;腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是血腦屏障的主要組成成分,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,,能夠限制可溶性物質(zhì)和細(xì)胞等從血液進(jìn)入大腦,,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與外周內(nèi)皮細(xì)胞相比具有一些相同特性。它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力,、調(diào)節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用,在腦血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義,。與外周內(nèi)皮細(xì)胞相同,,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)細(xì)胞粘附分子,,調(diào)控白細(xì)胞進(jìn)入大腦。由于微血管內(nèi)皮細(xì)胞的器官特異性,,內(nèi)皮細(xì)胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織,。其主要特征如下:①腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞存在許多細(xì)胞間緊密連接,產(chǎn)生很高的跨內(nèi)皮阻抗,,延遲細(xì)胞旁的通量,;②腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞缺乏內(nèi)皮細(xì)胞的窗孔結(jié)構(gòu),其液相物質(zhì)胞飲水平較低,;③腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞具有不對(duì)稱定位酶和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng),,從而產(chǎn)生“兩極分化”的表現(xiàn)型。
本公司生產(chǎn)的采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)CD31/vWF免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息:
M199、FBS,、內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑,、Heparin、Ascorbic Acid,、Hydrocortisone,、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):CM-R108)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。
T25瓶細(xì)胞處理方法
收到細(xì)胞后,,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,。如有破損漏液等問(wèn)題,,請(qǐng)即時(shí)。并進(jìn)行以下操作:
1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部,。
2.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3.預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,,1%雙抗),。
4.顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張),。
5.①若細(xì)胞密度較小,,無(wú)菌操作,去掉培養(yǎng)基,。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基,。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,,進(jìn)行傳代,。
②若細(xì)胞密度較大,達(dá)到80%以上,,將細(xì)胞傳代培養(yǎng),。
注:
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基,。由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,,這時(shí)請(qǐng)?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,。(這里是針對(duì)原來(lái)*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,,如果原來(lái)FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度) 收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題,,煩請(qǐng)當(dāng)天盡快并提供圖片,,以便售后處理。7天內(nèi)反饋,,細(xì)胞本身問(wèn)題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理,;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,不予免費(fèi)售后