抗核糖體P（IgG）ELISA是一種使用天然人的固相酶免疫測定法從真核細胞系分離的核糖體P蛋白P0,、P1和P2用于定量和定量分析人血清中核糖體P蛋白（rib-P）抗體的定性檢測?？箁ib-P抗體的特異性僅限于位于在三種P蛋白的高度保守的羧基末端部分,。該分析是一種工具研究系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的診斷。

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抗核糖體P（IgG）ELISA研究應(yīng)用和檢測原理：

核糖體磷蛋白P0（約38 kDa）,、P1（約19 kDa）和P2（約17 kDa）位于人類核糖體的60S亞基中,。與大多數(shù)堿性核糖體蛋白不同，P1和P2是酸性的,。核糖體蛋白與一個五聚體相關(guān)聯(lián),，其中兩個P1/P2異二聚體通過P2的氨基末端部分錨定在P0上。這個五聚體位于核糖體柄部的一個極易接近的區(qū)域,。生化研究表明,，P1/P2在核糖體多肽合成的三個階段（起始、轉(zhuǎn)位,、終止）中發(fā)揮著基本作用,。

研究表明，針對核糖體蛋白的自身抗體對系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）具有高度特異性,，因為它們不會出現(xiàn)在其他自身免疫疾病或感染中,。在隨機選擇的SLE患者中，抗核糖體蛋白（抗-rib-P）抗體的頻率為10-20%,。在有嚴(yán)重精神癥狀的狼瘡患者中,，抗-rib-P抗體的檢出頻率更高。此外,，研究表明,，包括腎臟和肝臟疾病在內(nèi)的其他器官受累可能與抗-rib-P的存在相關(guān)。

檢測原理

將稀釋至1:101的血清樣本孵育在涂有特定抗原的微孔板中,。

如果樣本中存在抗體,，它們會與抗原結(jié)合。未結(jié)合的部分在隨后的步驟中被洗掉,。之后,，與辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合的抗人M疫球蛋白（結(jié)合物）被孵育，并與微孔板中樣本的抗原-抗體復(fù)合物反應(yīng),。未結(jié)合的結(jié)合物在隨后的步驟中被洗掉,。加入TMB底物后，會產(chǎn)生一個酶促比色（藍色）反應(yīng),，這種反應(yīng)可以通過稀釋的酸停止（顏色變?yōu)辄S色）,。從色原生成的顏色強度是與抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合的結(jié)合物數(shù)量的函數(shù)，這與樣本中相應(yīng)抗體的初始濃度成正比,。

儲存和保質(zhì)期

將所有試劑和微孔板儲存在2-8°C/35-46°F的條件下,，存放在原始容器中,。一旦配制好，重新配制的溶液在2-8°C/35-46°F下可穩(wěn)定保存1個月,。試劑和微孔板只能在每個組件上標(biāo)示的有效期內(nèi)使用,。避免將TMB溶液暴露在強烈光線下。將微孔板存放在z定的鋁箔中,，包括干燥劑,，并密封緊密。

文獻參考：

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ALPCO產(chǎn)品種類多樣,，可測樣品來源包括人,、大/小鼠、豚鼠,、兔、豬,、羊,、狗、猴等,，涉及神經(jīng)生物學(xué),、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激,、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué),、甲狀腺功能,、腸胃病學(xué)、免疫學(xué),、生殖激素,、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域,，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長,。

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