C-反應(yīng)蛋白（CRP）ELISA是一種測定CRP的定量免疫測定法在人血清中,。僅供研究使用。不用于診斷或治療程序,。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理,，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品C-反應(yīng)蛋白ELISA。產(chǎn)品僅用于科研,，不可用于臨床診斷,。

C-反應(yīng)蛋白ELISA檢測原理：

CRP ELISA是一種兩步捕獲或“夾心"類型的免疫分析法。該分析法利用兩種高度特異性的單克隆抗體：一種針對CRP的單克隆抗體被固定在微孔板上,，另一種針對CRP不同表位的單克隆抗體與辣根過氧化物酶（HRP結(jié)合物）結(jié)合,。在第一次孵育步驟中,，樣品、校準品和對照品中存在的CRP被固定在微孔板上的抗體所結(jié)合,。通過洗滌步驟去除多余的未結(jié)合物質(zhì),。在第二次孵育步驟中，添加HRP結(jié)合的抗體（HRP結(jié)合物）,，它特異性地結(jié)合到任何固定的CRP上,，從而形成一個夾心復(fù)合物。通過洗滌步驟去除未結(jié)合的HRP結(jié)合物,。接下來,，添加TMB底物（酶底物），它與HRP反應(yīng)形成一種與CRP含量成正比的藍色產(chǎn)物,。通過添加終止液來終止酶促反應(yīng),，將顏色從藍色變?yōu)辄S色。在450納米處的微孔板讀取器上測量吸光度,。使用一組校準品繪制校準曲線,，從中可以直接讀取樣品和對照品中CRP的含量。

樣本收集與儲存：

血清：每次重復(fù)測定需要大約0.1毫升的血清,。收集4-5毫升靜脈血放入適當標記的試管中,，并讓其在室溫下凝固。在室溫下離心,，小心地將血清層轉(zhuǎn)移到新的標記儲存管中,。血清樣本可以在2-8°C下儲存長達24小時，或者在-10°C或更低的溫度下儲存,，以便稍后進行分析,。將所有人類樣本視為可能的生物危害物質(zhì)，并在處理時采取適當?shù)念A(yù)防措施,。

需要但未提供的試劑和設(shè)備

1. 校準的單通道移液器,，用于分配10微升、20微升和190微升,。

2. 校準的多通道移液器,，用于分配50微升、100微升,、200微升和300微升（如果手動洗滌）,。

3. 自動微孔板洗滌器（推薦使用）。

4. 一次性移液器槍頭,。

5. 蒸餾水或去離子水。

6. 微孔板振蕩器：

a. 軌道振蕩器（3毫米直徑）,，設(shè)置為600轉(zhuǎn)/分鐘,；

b. 往復(fù)振蕩器（1.5英寸行程長度）,，設(shè)置為每分鐘180次振蕩。

7. 校準的微孔板讀取器,，配備450納米濾光片,，上OD限為3.0或更高。

8. 聚丙烯/高密度聚乙烯或一次性玻璃管用于樣本預(yù)處理,。

9. 計時器,。

10. 渦旋混合器。

典型校準器曲線：僅采樣曲線,。請勿用于計算結(jié)果,。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人,、大/小鼠,、豚鼠、兔,、豬,、羊、狗,、猴等,，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝,、心血管疾病和氧化應(yīng)激,、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥,、內(nèi)分泌學(xué),、甲狀腺功能、腸胃病學(xué),、免疫學(xué),、生殖激素、抗體和抗原,、分子診斷等多個研究領(lǐng)域,，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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