Bi-CAT酶免疫分析是一種用于定量測(cè)定腎上腺素（epinephrine）和norepinephrine的酶免疫分析方法。該試劑盒是一個(gè)靈活的測(cè)試系統(tǒng),，適用于各種生物樣本類型和體積,。僅供研究使用,，不用于診斷程序,。腎上腺素和norepinephrine通過使用特定的親和凝膠進(jìn)行提取，然后進(jìn)行?；幚?，并最終通過酶促反應(yīng)轉(zhuǎn)化。競(jìng)爭(zhēng)性ELISA試劑盒采用微孔板格式,，其中抗原與微孔板的固態(tài)相綁定,。經(jīng)過酰化處理的標(biāo)準(zhǔn)品,、對(duì)照品,、樣本與固態(tài)相綁定的分析物競(jìng)爭(zhēng)有限的抗體結(jié)合位點(diǎn)。系統(tǒng)達(dá)到平衡后,，通過洗滌步驟去除未結(jié)合的抗原和抗原-抗體復(fù)合物,。使用以TMB為底物的抗兔IgG-過氧化物酶結(jié)合物檢測(cè)與固態(tài)相綁定的抗體，產(chǎn)生顏色反應(yīng),。該反應(yīng)在450nm處進(jìn)行監(jiān)測(cè),。通過與已知標(biāo)準(zhǔn)濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，實(shí)現(xiàn)對(duì)未知樣本的定量,。建議手動(dòng)處理ELISA，并由用戶負(fù)責(zé)驗(yàn)證自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的準(zhǔn)確性,。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理,，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品Bi-CAT（研究）ELISA。產(chǎn)品僅用于科研,，不可用于臨床診斷,。

Bi-CAT（研究）ELISA程序注意事項(xiàng)、指南和警告

(1) 本試劑盒僅供專業(yè)人士使用,。用戶應(yīng)充分理解本協(xié)議,，以成功使用本試劑盒。只有試劑盒附帶的測(cè)試說明書有效，必須使用該說明書進(jìn)行測(cè)試,。只有嚴(yán)格遵守和仔細(xì)遵循所提供的說明書,，才能獲得可靠的性能。

(2) 必須遵循良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范（GLP）的原則,。

(3) 為減少接觸潛在有害物質(zhì),，必要時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服、戴一次性手套和護(hù)目鏡,。

(4) 所有試劑盒試劑和樣本在使用前應(yīng)放置至室溫,，并輕輕但c底混合。避免試劑和樣本反復(fù)凍融,。

(5) 稀釋或重組時(shí),，請(qǐng)使用去離子水、蒸餾水或超純水,。

(6) 微孔板含有易折斷的條,。未使用的孔必須存放在2-8°C的密封鋁箔袋中，并在使用時(shí)放在提供的框架中,。從框架中取出的條應(yīng)標(biāo)記,，以避免混淆。

(7) 強(qiáng)烈建議進(jìn)行雙重樣本測(cè)量,，以幫助識(shí)別任何移液錯(cuò)誤,。

(8) 一旦開始測(cè)試，必須不間斷地完成所有步驟,。確保所需的試劑,、材料和設(shè)備在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間準(zhǔn)備就緒。

(9) 孵育時(shí)間會(huì)影響結(jié)果,?？椎奶幚響?yīng)按照相同的順序和時(shí)間間隔進(jìn)行。

(10) 為避免試劑交叉污染,，請(qǐng)使用新的一次性移液器槍頭分配每種試劑,、樣本、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品,。

(11) 每次運(yùn)行都必須建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,。

(12) 每次運(yùn)行都應(yīng)包括對(duì)照品，并且必須在建立的置信限內(nèi),。置信限列在QC報(bào)告中,。

(13) 不要在測(cè)試中混合不同批號(hào)的試劑盒組分，不要使用試劑盒標(biāo)簽上顯示的過期日期之后的試劑,。

(14) 避免接觸含有0.25 M H2SO4的停止液,。它可能會(huì)引起皮膚刺激和灼傷。如果接觸到眼睛或皮膚，請(qǐng)立即用水沖洗,。

(15) TMB底物對(duì)皮膚和粘膜有刺激性,。如果可能接觸到，請(qǐng)用大量水沖洗眼睛,，用肥皂和大量水清洗皮膚,。在重復(fù)使用之前清洗受污染的物品。

(16) 有關(guān)試劑盒中包含的危險(xiǎn)物質(zhì)的信息,，請(qǐng)參考安全數(shù)據(jù)表（SDS）,。該試劑盒的安全數(shù)據(jù)表可直接在ALPCO網(wǎng)站上獲得或根據(jù)要求提供。

(17) 試劑盒試劑必須視為危險(xiǎn)廢物,，并根據(jù)當(dāng)?shù)睾蛧曳ㄒ?guī)進(jìn)行處理,。

(18) 如果試劑盒或組件有任何嚴(yán)重?fù)p壞，必須在收到試劑盒后一周內(nèi)書面通知ALPCO,。嚴(yán)重?fù)p壞的單個(gè)組件不得用于測(cè)試運(yùn)行,。它們必須妥善存放，直到做出決定,。如果決定它們不再適合測(cè)量,，必須按照當(dāng)?shù)睾蛧曳ㄒ?guī)進(jìn)行處理。

結(jié)果計(jì)算

通過繪制標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度讀數(shù)（計(jì)算平均吸光度,，線性,，y軸）與相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品濃度（對(duì)數(shù)，x軸）的圖,，可以得到用于確定樣品中濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線,，標(biāo)準(zhǔn)A的濃度為0.001 ng/mL。由于數(shù)據(jù)以對(duì)數(shù)形式呈現(xiàn),，這種對(duì)齊是強(qiáng)制性的,。使用非線性回歸進(jìn)行曲線擬合（例如4參數(shù)，Marquardt算法）,。這項(xiàng)檢測(cè)是一種競(jìng)爭(zhēng)性檢測(cè),。這意味著：隨著分析物濃度的增加，OD值會(huì)降低,。在標(biāo)準(zhǔn)曲線下方發(fā)現(xiàn)的OD值對(duì)應(yīng)于樣品中分析物的高濃度,，必須報(bào)告為陽性。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上取得的樣品濃度必須乘以一個(gè)校正因子,。

校正因子 = 20 ?L（提取的標(biāo)準(zhǔn)品體積）/ 提取的樣品體積（?L）

例如：提取了750 ?L的樣品,。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上得到濃度為0.15 ng/mL的norepinephrine,。

校正因子 = 20/750 = 0.027

樣品濃度 = 0.15 ng/mL x 0.027 = 0.004 ng/mL = 4 pg/mL norepinephrine

轉(zhuǎn)換

腎上腺素 (ng/mL) x 5.46 = 腎上腺素 (nmol/L)

norepinephrine (ng/mL) x 5.91 = norepinephrine (nmol/L)

ALPCO產(chǎn)品種類多樣,，可測(cè)樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠,、兔,、豬、羊,、狗,、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué),、骨代謝,、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、糖尿病和肥胖癥,、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能,、腸胃病學(xué),、免疫學(xué)、生殖激素,、抗體和抗原,、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長(zhǎng),。

作為ALPCO在中國區(qū)域的代理,，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。

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