ICA（胰島細胞抗體）ELISA是一種定性ELISA檢測,，用于檢測針對胰島細胞抗原的循環(huán)IgG抗體,。此試劑盒僅供研究使用,，不用于診斷程序,。

依賴胰島素的糖尿?。↖DDM）或1型糖尿病是一種使人衰弱的慢性疾病,，它損害了關鍵激素胰島素的產生和分泌,，并改變了血糖代謝。胰島素是由胰島細胞或蘭格漢斯島（1）合成和分泌的,。在IDDM中,，胰島素合成的中斷是由自身抗體對胰島細胞的免疫破壞引起的（2-4）,。這種異常（自身免疫）可能是遺傳的和/或由接觸有毒化學物質、病毒感染以及各種形式的壓力觸發(fā)的（5）,。研究表明,，IDDM有一個特征性的無癥狀糖尿病前期，可能持續(xù)數年,。在這段時間里,，研究表明受影響的個體在對靜脈/k服葡萄糖挑戰(zhàn)的反應中表現出胰島素早期釋放的減少。在大多數情況下,，這些個體攜帶循環(huán)的胰島細胞自身抗體（ICA）和/或胰島素自身抗體（IAA）,。研究表明，ICA可以在IDDM發(fā)病前8年就被檢測到（6）,，因此可能作為疾病的早期指標或對疾病的易感性,。ICA陽性的個體可能會顯示出胰島細胞功能的逐漸喪失，這表明早期胰島素釋放的中斷,。研究表明,，當這種早期胰島素釋放w全停止時，明顯的IDDM就會發(fā)展（6）,。在最近發(fā)病的IDDM個體中,，70%存在胰島細胞自身抗體（13,14），而對照非糖尿病人群的這一比例為0.1-0.5%（11,15）,。ICA也在IDDM個體的一級親屬中被檢測到,。這些個體構成了人類人群中有高風險發(fā)展IDDM的群體。一些研究報告稱,，IDDM個體的ICA陽性一級親屬隨后發(fā)展為糖尿?。?6-19）。其他研究也表明,，血清ICA和IAA的存在是發(fā)展IDDM可能性增加的指標（3,6-12）,。因此，ICA的血清學檢測可能是研究IDDM發(fā)展的有力工具,。這些自身抗體作為IDDM標志物的研究意義也體現在它們存在于最終發(fā)展為IDDM的非糖尿病個體中,。Riley等人最近報告稱，在2型糖尿病患者中測定ICA可以識別IDDM的發(fā)病前并預測對胰島素治療的需求（20）,。研究表明，攜帶血清ICA的2型糖尿病患者可能會惡化為胰島素依賴,。目前,，血清ICA是通過間接免疫熒光和組織化學方法測定的，這些方法使用冷凍未固定的人類/靈長類動物或嚙齒動物胰腺切片作為底物,。盡管自1974年最初描述以來,，人們嘗試了各種改進和修改這一程序（22,23），但間接免疫熒光/組織化學技術存在固有的方法學問題。技術的標準化證明非常困難,。這種“冷凍切片"技術的可靠性受到從一個胰腺到另一個胰腺的變化,、不可避免地需要未固定的胰腺組織以及適當組織不常見的可用性等因素的影響。ICA（胰島細胞抗體）ELISA使用一組純化的胰島細胞特異性抗原在微孔板ELISA程序中檢測血清ICA的存在,。

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胰島細胞Ab (ICA) EIA(96孔)檢測原理：

一種純化的胰臟抗原混合物被固定在微孔板上,。在孵育期間,，血清樣本中的抗體被允許在室溫下與微孔板上的抗原分子反應。洗滌掉多余的/未結合的血清物質后,，添加一種酶（堿性磷酸酶）標記的山羊抗體,，該抗體特異性結合人類IgG，加入到抗原-抗體復合物中,。經過再次c底洗滌后,，加入底物（PNPP），并使用分光光度計測量產生的色素,。色素的強度與樣本中ICA的濃度成正比,。ICA陽性對照作為內部質量控制，確保結果的有效性,。

試劑盒中提供的所有試劑僅供研究使用,。

1. 潛在生物危害材料

校準品和對照品的基質是人血清。所用的人血清在使用FDA許可的試劑進行測試時,，被發(fā)現對HBsAg,、抗HIV 1/2和抗HCV無反應。由于沒有任何測試方法可以w全保證HIV,、乙型肝炎病毒,、丙型肝炎病毒或其他傳染性病原體的缺失，因此應將這些試劑視為潛在的傳染性物質進行處理,。

2. d氮化鈉

一些試劑含有作為防腐劑的d氮化鈉,。d氮化鈉可能與管道中的鉛、銅或黃銅發(fā)生反應,，形成爆炸性的金屬疊氮化物,。在處理這些材料時，總是要用大量的水沖洗,，以防止疊氮化物積累,。

3. 終止液

終止液由1N氫氧化鈉組成,。這是一種強堿，應謹慎處理,。它可能導致灼傷,，處理時應戴手套。戴上眼部保護和適當的防護f,。避免吸入,。在用紙巾吸收之前，用水稀釋泄漏物,。

4. 底物溶液

底物溶液由對硝基苯磷酸酯（PNPP）組成,，這是一種在本ELISA中使用的非蛋白色素原底物。偶爾底物可能會呈現黃色,。這種顏色不會干擾檢測結果,。

預防措施

1. 不要冷凍測試試劑，始終將所有試劑盒組分存放在2-8°C的環(huán)境中,。

2. 每次進行檢測時,，都必須運行陽性和陰性對照。

3. 只使用清晰的血清作為測試樣本,。測試樣本不應有嚴重的渾濁,、溶血或微生物污染。

4. 所有樣本都應進行雙重分析,。

5. 不要混合不同批次的試劑,。

6. 不要使用過期的試劑。

7. 不要讓試劑在室溫下長時間放置,。

8. 不要讓底物溶液暴露在光線下,。

9. 為了獲得可重復和準確的結果，需要精確的移液技術,。

文獻參考：

1. Orci, L., J. Vassali, and A. Parrelet (1988). The insulin factory. Sci. Amer., 261:85-94.

2. Eisenbarth, G.S. (1985). Type I diabetes: A ch ronic autoimmune disease. New Engl. J.Med., 314:1360-1368.

3. Eisenbarth, G.S., J. Connelly, and J.S. Soeldner (1987). The natural hist ory of Type Idiabetes. Diabet./Metab. Rev., 3:873-891.

4. Etzioni, A. (1987). Immunological concepts i n insulin-dependent (Type I) DiabetesMellitus Immunol Res., 6:224-251.

ALPCO產品種類多樣,，可測樣品來源包括人、大/小鼠,、豚鼠,、兔、豬,、羊,、狗、猴等,，涉及神經生物學,、骨代謝、心血管疾病和氧化應激,、細胞因子與信號轉導,、糖尿病和肥胖癥、內分泌學,、甲狀腺功能,、腸胃病學、免疫學,、生殖激素,、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域,，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長,。

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