Leutenizing Horome（LH）ELISA是一種酶免疫測定法，用于定量檢測尿液中的LH,。該測試用于檢測中期LH激增尿蛋白，這有助于預(yù)測排卵時(shí)間,。用于美國境內(nèi)的體外診斷,。僅供美國境外研究使用。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理,，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品黃體生成素(尿)酶聯(lián)免疫吸附測定(96孔)IVD使用,。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷,。

黃體生成素(尿)酶聯(lián)免疫吸附測定(96孔)IVD使用檢測原理：

LH ELISA試劑盒是一種基于夾心原理的固相酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）,。微孔板的孔中涂有針對(duì)LH分子β亞單位的d特抗原位點(diǎn)的單克隆（小鼠）抗體,。在第一次孵育期間,，添加的樣本中的LH分子的β亞單位與固定的抗體結(jié)合。孵育后,，加入的結(jié)合物溶液（含有與辣根過氧化物酶結(jié)合的抗LH抗體）與LH結(jié)合,，形成一個(gè)夾心復(fù)合物。經(jīng)過洗滌步驟去除所有未結(jié)合的物質(zhì)后,，固相與底物溶液孵育,。通過加入停止溶液來突然停止比色反應(yīng)，測量產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物的光密度（OD）,。顏色的強(qiáng)度與樣本中分析物的濃度成正比,。通過繪制標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)應(yīng)的OD值來構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線,，并使用這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線來確定未知樣本的濃度。

測定程序：

每次運(yùn)行都必須包括一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線,。

1. 在框架支架中固定所需數(shù)量的微孔板孔,。

2. 使用新的一次性吸頭，將每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品,、對(duì)照品和樣本的50微升分別加入相應(yīng)的孔中,。

3. 在室溫下孵育30分鐘。

4. 向每個(gè)孔中加入100微升酶結(jié)合物,。c底混合10秒鐘,。這一步w全混合非常重要。

5. 在室溫下孵育30分鐘,。

6. 迅速搖出孔內(nèi)的內(nèi)容,。手動(dòng)洗滌時(shí)，每個(gè)孔用300微升1倍工作洗液洗滌3次,。在吸水紙上用力敲擊孔以去除殘留液滴,。重要說明：正確的洗滌顯著影響此測定的靈敏度和精確度！

7. 向每個(gè)孔中加入100微升底物溶液,。

8. 在室溫下孵育10分鐘,。

9. 通過向每個(gè)孔中加入50微升停止溶液來停止酶促反應(yīng)。

10. 使用微孔板讀數(shù)器,，在450納米（讀數(shù)）和620納米至630納米（背景減除,，推薦）測定每個(gè)孔的吸光度（OD）。建議在加入停止溶液后10分鐘內(nèi)讀取孔,。

結(jié)果計(jì)算：

1. 計(jì)算每組標(biāo)準(zhǔn)品,、對(duì)照品和樣本的平均吸光度值。

2. 使用半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙,，通過將每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的平均吸光度與其濃度繪制在垂直（Y）軸上的吸光度和水平（X）軸上的濃度上,，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3. 使用每個(gè)樣本的平均吸光度值,，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上確定相應(yīng)的濃度,。

4. 自動(dòng)化方法：IFU中的結(jié)果已經(jīng)使用4-PL（4參數(shù)邏輯）曲線擬合自動(dòng)計(jì)算。4參數(shù)Rodbar或4參數(shù)Marquardt Logistics是s選方法,。其他數(shù)據(jù)簡化函數(shù)可能會(huì)給出略有不同的結(jié)果,。

樣品的濃度可以直接從該標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。濃度高于最高標(biāo)準(zhǔn)的樣品必須進(jìn)一步稀釋或報(bào)告為>200 mIU/mL,。在計(jì)算濃度時(shí)，必須考慮該稀釋系數(shù),。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣,，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠,、兔,、豬、羊,、狗,、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué),、骨代謝,、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、糖尿病和肥胖癥,、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能,、腸胃病學(xué),、免疫學(xué)、生殖激素,、抗體和抗原,、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長,。

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