弓形蟲IgA酶免疫測定試劑盒為定性和半定量測定人血清或血漿中弓形蟲IgA類抗體（EDTA或肝素）提供了材料,。本試驗僅供研究使用。不適用于獨(dú)立程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品剛地弓形蟲(IgA) ELISA，(96孔),。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷,。

剛地弓形蟲(IgA) ELISA,，(96孔)檢測原理：

弓形蟲IgA ELISA試劑盒是一種固相酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）。樣本用y本稀釋液稀釋,，并額外與IgG-RF吸附劑一起孵育,，以消除特定IgG的競爭性抑制。這種預(yù)處理避免了假陰性結(jié)果,。

微孔板作為固相,，涂有滅活的弓形蟲可溶性抗原（RH株）。稀釋后的樣本和現(xiàn)成可用的對照品被移液至這些孔中,。在孵育過程中,，陽性樣本和對照品中的弓形蟲特異性抗體與固定的抗原結(jié)合。

經(jīng)過洗滌步驟去除未結(jié)合的樣本和對照材料后,，辣根過氧化物酶結(jié)合的抗人IgA抗體被加入孔中,。在第二次孵育過程中，這種抗IgA結(jié)合物特異性地結(jié)合到IgA抗體上,，形成酶聯(lián)免疫復(fù)合物,。

經(jīng)過第二次洗滌步驟去除未結(jié)合的結(jié)合物后，形成的免疫復(fù)合物（在陽性樣本的情況下）通過與TMB底物孵育和發(fā)展出藍(lán)色來檢測,。通過使用硫酸停止酶指示劑反應(yīng),，藍(lán)色變?yōu)辄S色。

這種顏色的強(qiáng)度與樣本中弓形蟲特異性IgA抗體的數(shù)量直接成正比,。使用ELISA微孔板讀數(shù)器在450納米處讀取吸光度,。

提供的試劑：

1. 微孔板，12 x 8（可拆分）條,，96孔；孔涂有滅活的弓形蟲可溶性抗原（RH株）,。（包括1個條架和1個蓋箔）

2. y本稀釋液*,，1瓶，100 mL,，即用型,，呈黃色；pH 7.2 ± 0.2,。

3. IgG-RF-吸附劑*,，1瓶，6.5 mL,，即用型,，呈黃色；含有抗人IgG類抗體,。

4. 陽性對照*,，1瓶,，1.0 mL，即用型,；呈黃色,，紅色瓶蓋。

5. 陰性對照*,，1瓶,，2.0 mL，即用型,；呈黃色,，黃色瓶蓋。

6. 截止對照*,，1瓶,，2.0 mL，即用型,；呈黃色,，黑色瓶蓋。

7. 酶結(jié)合物*,，1瓶,，20 mL，即用型,，呈紅色,，抗人IgA抗體結(jié)合到辣根過氧化物酶。

8. 底物溶液,，1瓶,，14 mL，即用型,，四甲基聯(lián)苯胺（TMB）,。

9. 停止溶液，1瓶,，14 mL,，即用型，含有0.2 mol/l H2SO4,，避免與停止溶液接觸,。它可能會引起皮膚刺激和灼傷。

10. 洗滌溶液*,，1瓶,，30 mL（20倍濃縮用于600 mL），pH 6.5 ± 0.1，見“試劑準(zhǔn)備",。* 含有非汞防腐劑

一般說明：

? 在開始測試之前,，非常重要的一點(diǎn)是將所有試劑、樣本和對照品置于室溫,！

? 一旦測試開始,，應(yīng)不間斷地完成所有步驟。

? 使用新的一次性塑料移液管尖嘴吸頭,，每個標(biāo)準(zhǔn)品,、對照品或樣本都要更換，以避免交叉污染,。

? 吸光度是孵育時間和溫度的函數(shù),。在開始測定之前，建議所有試劑都準(zhǔn)備好,，移除瓶蓋,，所有需要的孔都固定在架上等。這將確保每個移液步驟的間隔時間相等,，無中斷,。

? 通常，酶促反應(yīng)與時間和溫度成線性關(guān)系,。

? 使用后立即緊密封閉試劑瓶,，以避免蒸發(fā)和微生物污染。

? 為了避免交叉污染和錯誤升高的結(jié)果,，準(zhǔn)確移液樣本,，并在不濺出的情況下將結(jié)合物準(zhǔn)確分配到孔的底部。

? 在37°C孵育期間,，用箔紙覆蓋微孔板條,，以避免蒸發(fā)。

文獻(xiàn)參考：

1. P. Cassinotti, Human Toxoplasma gondii infections and their diagnosis Alpe Adria Microbiologiy Journal1995, 4, 235-246

2. M. Schleuning, Toxoplasma gondii Infektionen Deutsches ?rzteblatt 93, Heft 43, (Oktober 1996), B2182-B2185

3. NCCLS. Clinical Use and Interpretation of Serologic Tests for Toxoplasma gondii; Approved Guideline.NCCLS document M36-A [ISBN 1-56238-523-2]. NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA19087-1898 USA, 2004.

4. Wilson M, Jones JL, McAuley JM. Toxoplasma. In: Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Jorgensen JH,Yolken RH, editors. Manual of Clinical Microbiology. 8th ed. Washington, D.C.: American Society forMicrobiology; 2003. p. 1970-1980.

5. Remington JS, McLeod R, Thulliez P, Desmonts G. Toxoplasmosis. In: Remington JS, Klein JO, editors.Infectious Diseases of the Fetus and Newborn Infant. 5th ed. Philadelphia, PA: The WB Saunders Co.;2001. p. 205-346.

ALPCO產(chǎn)品種類多樣,，可測樣品來源包括人,、大/小鼠、豚鼠,、兔、豬,、羊,、狗、猴等,，涉及神經(jīng)生物學(xué),、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、糖尿病和肥胖癥,、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能,、腸胃病學(xué),、免疫學(xué)、生殖激素,、抗體和抗原,、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長,。

作為ALPCO在中國區(qū)域的代理,，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。