孕烯醇酮EIA(96孔),，IVD使用：人血清酶免疫法直接定量測定孕烯醇酮,。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品孕烯醇酮EIA(96孔),，IVD使用,。產(chǎn)品僅用于科研,，不可用于臨床診斷。

孕烯醇酮EIA(96孔),，IVD使用檢測原理：

以下酶免疫測定測試的原理遵循兩步競爭性結(jié)合場景。在第一次孵育過程中,，未標記的抗原（存在于標準品,、對照品和患者樣本中）和生物s標記抗原（生物s偶聯(lián)物）之間發(fā)生競爭，以獲得微板上有限數(shù)量的抗體結(jié)合位點,。洗滌和潷析程序可以去除未結(jié)合的物質(zhì),。在第二次孵育過程中，加入鏈霉抗生物s蛋白-HRP（HRP偶聯(lián)物）并與生物s偶聯(lián)物結(jié)合,。洗滌步驟后，加入酶底物,。通過加入終止溶液終止酶促反應(yīng),。在微量滴定板讀數(shù)器上測量吸光度。形成的顏色強度與樣品中孕烯醇酮的濃度成反比。使用一組標準來繪制標準曲線,，從中可以直接讀取患者樣本和對照中的孕烯醇酮含量,。

孕烯醇酮（3β-羥基孕-5-烯-20-酮）是類固醇生物合成途徑中從d固醇衍生出的第一個類固醇，并且是所有腎上腺和性腺類固醇的共同前體,。它的生成發(fā)生在線粒體中,，通過P-450SCC酶對d固醇的C-20側(cè)鏈進行裂解。一旦生成,，孕烯醇酮可以通過兩條類固醇生物合成途徑被利用,。孕烯醇酮可以通過17α-羥化酶的酶促作用轉(zhuǎn)化為17-OH-孕烯醇酮，或通過3β-羥基類固醇脫氫酶的酶促作用轉(zhuǎn)化為孕酮,。

在先天性腎上腺增生癥（CAH）的幾種形式中,，由于3β-羥基類固醇脫氫酶缺乏或17α-羥化酶缺乏，會出現(xiàn)孕烯醇酮水平升高,。在患有特發(fā)性多毛癥的女性中也有較高水平的報道,。關(guān)于性別和年齡差異對孕烯醇酮水平影響的研究表明，女性和男性的最大水平分別出現(xiàn)在大約17歲和16歲左右,，而最小水平分別出現(xiàn)在大約37歲和38歲左右,。總的來說,，女性的數(shù)值比男性略高,。

仍有待進一步研究孕烯醇酮生理學(xué)的許多領(lǐng)域。當前研究表明,，在血清中測定孕烯醇酮可能對研究其代謝物孕烯醇酮硫酸酯有用,，已有報道該物質(zhì)在哺乳動物大腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中具有多種效應(yīng)。

程序注意事項和警告：

1. 用戶應(yīng)充分理解本協(xié)議以成功使用此試劑盒,。只有通過嚴格和仔細遵循提供的說明,，才能獲得可靠的性能。

2. 建議所有客戶準備自己的控制材料或血清池,，應(yīng)在每次運行中包含高濃度和低濃度水平,，以評估結(jié)果的可靠性。

3. 當z定使用水進行稀釋或重組時,，使用去離子水或蒸餾水,。

4. 為了減少接觸潛在有害物質(zhì)，處理試劑盒試劑和人類樣本時應(yīng)佩戴手套,。

5. 所有試劑盒試劑和樣本在使用前應(yīng)置于室溫并輕輕但c底混合,。避免反復(fù)凍融試劑和樣本。

6. 每次運行都必須建立校準曲線,。

7. 試劑盒中提供的對照應(yīng)包含在每次運行中,，并應(yīng)落在既定的置信限內(nèi),。

8. 當對照的測定值不反映既定范圍時，可能表明程序技術(shù)不當,、移液不精確,、洗滌不w全以及試劑儲存不當。

9. 在讀取微孔板時,，孔中的氣泡會影響光密度（OD）,。在執(zhí)行讀取步驟之前仔細去除任何氣泡。

10. 底物溶液（TMB）對光敏感,，如果儲存得當,，應(yīng)保持無色。如果出現(xiàn)藍色,，則不應(yīng)使用,，這可能表明不穩(wěn)定性或污染。

11. 分發(fā)底物和終止溶液時,，不要使用這些液體會接觸到任何金屬部件的移液管,。

12. 為了防止試劑污染，分配每種試劑,、樣本,、標準和對照時使用新的一次性移液管尖。

13. 不要在測試中混合不同批號的試劑盒組分,，并且不要使用標簽上打印的過期日期之外的任何組分,。

14. 試劑盒試劑必須被視為危險廢物，并根據(jù)國家規(guī)定進行處理,。

典型校準器曲線

僅示例曲線,。請勿用于計算結(jié)果。

文獻參考：

1. Abraham GE, et al. Radioimmunoassay of Plasma Pregnenolone, 17-hydroxypregnenolone and Dehydroepiandrosterone Under Various Physiological Conditions. JClin Endocrinol Metab. 1973; 37(1):140–4.

2. Hill M, et al. Age Relationships and Sex Differences in Serum Levels of Pregnenoloneand 17-hydroxypregnenolone in Healthy Subjects. Clin Chem Lab Med. 1999;37(4):439–47.

3. Robel P, et al. Biosynthesis and Assay of Neurosteroids in Rats and Mice. J SteroidBiochem Mol Biol. 1995; 53:355–60.

ALPCO產(chǎn)品種類多樣,，可測樣品來源包括人,、大/小鼠、豚鼠,、兔,、豬、羊,、狗,、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué),、骨代謝,、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、糖尿病和肥胖癥,、內(nèi)分泌學(xué),、甲狀腺功能、腸胃病學(xué),、免疫學(xué)、生殖激素,、抗體和抗原,、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長,。

作為ALPCO在中國區(qū)域的代理,，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。

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