Glucagon ELISA是一種用于定量測定胰高血糖素（Glucagon）的酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù),。胰高血糖素是一種由胰腺產(chǎn)生的多肽激素,，具有29個氨基酸，在葡萄糖代謝和維持血糖平衡中起著關(guān)鍵作用,。這種ELISA試劑盒能夠特異性地檢測人,、小鼠、大鼠等不同物種的血清,、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的胰高血糖素水平,。

該試劑盒具有高靈敏度和強(qiáng)特異性，能夠與胰高血糖素特異性結(jié)合,，而與人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）,、β-神經(jīng)生長因子（β-NGF）、神經(jīng)生長因子3（NT-3）,、神經(jīng)生長因子4（NT-4）,、睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子（CNTF）等沒有交叉反應(yīng)。此外,，與大鼠胰高血糖素有35%的交叉反應(yīng),，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,，這表明其具有良好的重復(fù)性和可靠性,。

本試劑盒僅供專業(yè)使用，僅供實(shí)驗(yàn)室使用,。

艾美捷Glucagon ELISA（ALP-48-GLUHU-E01）組成部分：

1. 抗體包被板

2. 胰高血糖素標(biāo)準(zhǔn)品

3. 標(biāo)記抗原

4. SA-HRP溶液

5. 底物緩沖液

6. OPD片

7. 終止溶液

8. 緩沖液（A）

9. 緩沖液（B）

10. 濃縮洗滌液

11. 粘附膜

Glucagon ELISA特性：

該試劑盒以敏感的定量能力和高分析特異性為特點(diǎn),。此外，它不受血漿樣本中其他組分的影響,，且無需樣本預(yù)處理,。本試劑盒中使用的胰高血糖素標(biāo)準(zhǔn)品是一種高純度的合成產(chǎn)品（純度高于98%）,，生物素標(biāo)記的胰高血糖素經(jīng)過HPLC純化。

胰高血糖素ELISA試劑盒分析特異性：

該ELISA試劑盒對胰高血糖素具有高分析特異性,，并且對腸道高血糖素,、GLP-1和GLP-2沒有交叉反應(yīng)。

Glucagon ELISA檢測原理：

本ELISA試劑盒用于測定大鼠,、小鼠或人血漿樣本中的胰高血糖素,，基于一種競爭性酶免疫分析，使用一種高特異性的抗胰高血糖素抗體和生物素-親和素系統(tǒng),。96孔板用兔抗胰高血糖素抗體包被,。將胰高血糖素標(biāo)準(zhǔn)品或樣本和生物素標(biāo)記的胰高血糖素抗原加入孔中進(jìn)行競爭性免疫反應(yīng)。孵化和板洗滌后,，加入HRP標(biāo)記的鏈霉親和素（SA-HRP）,，在孔的表面形成HRP標(biāo)記的鏈霉親和素-生物素標(biāo)記的胰高血糖素-抗體復(fù)合物。最后,，通過 OPD 測定HRP酶活性,，并計算大鼠、小鼠或人胰高血糖素的濃度,。

材料：

設(shè)備需求（不提供）：

1. 能夠讀取在490納米處的吸光度2.5的微孔板閱讀器,。

2. 能夠以100轉(zhuǎn)每分鐘的速度搖動的微孔板振蕩器。

3. 微孔板洗滌裝置及帶抽吸系統(tǒng)的分配器,。

4. 用于8孔或12孔的微量移液管和多通道移液管及其吸頭,。

5. 用于制備標(biāo)準(zhǔn)溶液的試管。

6. 1000毫升的量筒,。

7. 蒸餾水或去離子水,。

樣本處理：

血漿樣本的準(zhǔn)備

推薦使用含EDTA-2Na的血液采集管來收集血漿樣本，并應(yīng)立即添加抑肽酶（每1毫升血液添加500kIU）,。強(qiáng)烈建議在采集后盡快測試血漿樣本,。如果需要延后測試，應(yīng)將樣本分裝到試管中,，并在-30°C或更低溫度下冷凍（推薦-70°C以下）,，在分析前解凍。避免樣本反復(fù)凍融,。

試劑準(zhǔn)備：

1. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的準(zhǔn)備：取標(biāo)準(zhǔn)品（凍干的大鼠/小鼠/人胰高血糖素,，每瓶10ng）用1毫升緩沖液（A）進(jìn)行溶解，得到濃度為10000 pg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液,。取0.5毫升溶解后的標(biāo)準(zhǔn)溶液,，并用1.0毫升緩沖液（A）稀釋，得到3333 pg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。按相同稀釋比例依次制備出其他濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液（1111, 370, 123, 和 41 pg/mL）,。以緩沖液（A）作為0 pg/mL的對照,。

2. 標(biāo)記抗原溶液的準(zhǔn)備：用6毫升緩沖液（B）溶解標(biāo)記的抗原。

3. 底物溶液的準(zhǔn)備：將1片OPD片溶解在12毫升底物緩沖液中,。應(yīng)在使用前立即準(zhǔn)備。

4. 洗滌溶液的準(zhǔn)備：用蒸餾水或去離子水將50毫升濃縮洗滌溶液稀釋至1000毫升,。

5. 其他試劑：其他試劑直接使用,。