Tubulin porcine brain，T240-DX——微管蛋白（豬腦,， 純度>99%）采用Shelanski等人的方法從豬腦中純化出微管蛋白,，并用陽離子交換層析進一步純化到99%以上的純度。白色凍干粉供應,。

一,、Tubulin porcine brain的用途

主要表現(xiàn)在五個方面：

1.抗微管蛋白配體的IC50和EC50測定；

2.微管結合研究,；

3.微管蛋白單體結合研究,；

4.HDAC6研究；

5.微管激活的運動蛋白atp酶分析,。

二,、Tubulin porcine brain的材料組成

采用Shelanski等人的方法從豬腦中純化出微管蛋白，并用陽離子交換層析進一步純化到99%以上的純度,。白色凍干粉供應,。

該產品具有*的聚合活性,，采用zhuanli技術進行凍干以提高穩(wěn)定性和使用壽命,。T240在4°C干燥條件下穩(wěn)定1年。如果您的項目需要相同批次的微管蛋白以獲得一致的結果,，強烈建議您批量購買該產品,，以節(jié)省時間和金錢。本品可替代我們的高純度牛微管蛋白產品（Cat,。#TL238,、T238和T237），并以相同的方式工作,。

三,、Tubulin porcine brain的純度

通過SDS-PAGE凝膠上的蛋白質掃描密度測定。樣品純度>99%,。

四,、Tubulin porcine brain的生物活性

微管蛋白的一個單位定義為5.0 mg純化蛋白（由精密紅色高級蛋白分析試劑cat測定）。#ADV02）,。通過微管蛋白聚合試驗評估T240的生物活性,。微管蛋白聚合成微管的能力可以通過觀察340nm處微管蛋白溶液的光密度增加來觀察,。當使用分光光度計路徑長度為0.8 cm（1/2面積96孔板中的樣品體積為180µl）時，一般微管蛋白緩沖液中的5 mg/ml微管蛋白溶液加上5%甘油和1 mM GTP,，應在30分鐘內獲得0.75-1.10的OD340 nm讀數(shù),。

需要注意的是，微管蛋白減去甘油在G-PEM緩沖液中不會聚合,，直到微管蛋白濃度非常高（>10 mg/ml）,。即使在這些濃度下，聚合也相對緩慢,。在低濃度微管蛋白-甘油的情況下,，可通過添加聚合促進化合物（例如甘油、紫杉醇或二甲基亞砜）實現(xiàn)高效聚合,。

五,、關于微管蛋白的兩個問題

Q1：儲存微管蛋白以確保穩(wěn)定性和活性的正確方法是什么？

A：微管蛋白凍干產品的建議儲存條件為4°C,，并添加干燥劑,，以保持濕度小于10%的濕度。在這些條件下,，蛋白質可以穩(wěn)定6個月,。凍干蛋白質也可以在-70°C下干燥保存，在那里它可以穩(wěn)定6個月,。但是,，在-70°C時，管蓋上的橡膠密封件可能會破裂并進入濕氣,。因此,，我們建議在4°C下儲存。如果在-70°C下儲存,，如果使用這種儲存條件,，則必須在凍干蛋白質中加入干燥劑。按照指示重組蛋白質后,，應將G-PEM緩沖液中的濃縮蛋白質等份,，在液氮中快速冷凍，并在-70°C下儲存（穩(wěn)定6個月）,。注：在液氮中快速冷凍微管蛋白是非常重要的,，因為其他冷凍方法會導致活性顯著降低。在室溫水浴中快速解凍1分鐘,。避免反復凍融循環(huán),。

Q2：為什么細胞骨架推薦使用普通微管蛋白緩沖液和GTP來恢復微管蛋白？

A：為了維持微管蛋白和微管蛋白的構象,，我們推薦使用GTP+tubulin單體,。對于再懸浮,，我們建議使用普通微管蛋白緩沖液（Cat。#BST01-001）,，包括80 mM管道,，2 mM MgCl2，1 mM EGTA,，pH 7.0,，補充1 mM GTP（Cat。#BST06-001）,。微管蛋白需要GTP和鎂離子來維持適當?shù)姆€(wěn)定性和構象,，即使是單體狀態(tài)。聚合過程中還需要GTP,，因為它在微管蛋白聚合過程中的水解是發(fā)生聚合所必需的,。EGTA是鈣的螯合劑，是微管蛋白聚合的有效抑制劑,。甘油通常被添加到5-10%的濃度,，以增強聚合；然而,，甘油不是維持生物活性微管蛋白所必需的,，在重組和儲存微管蛋白時也不需要包含甘油。在對重組微管蛋白進行分批儲存時,，必須在濃度大于6 mg/ml的液氮中對微管蛋白進行等分和快速冷凍,，以保持微管蛋白的生物活性。然后,，應將等分試樣儲存在-70°C下,。解凍等分試樣時，應在室溫水浴中快速解凍,，并將其放在冰上,，直到試驗使用之前,。

艾美捷Cytoskeleton公司成立于1993年,，專注于生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產。公司提供藥物篩選,、信號轉導,、蛋白質轉錄后修飾（PTM）、細胞骨架研究相關的系列試劑盒和產品,，尤其以細胞骨架相關研究見長,，既能滿足于樣品較少的科學研究，也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究,。此外,，公司還提供微管蛋白,，肌動蛋白，小G蛋白,，GAPs,，GEFs等現(xiàn)有產品的藥物篩選服務。