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細胞凋亡的過程是細胞死亡中的研究熱門課題,,接下來本文會講一下細胞死亡的原因及方式,,以及相關(guān)的一些研究工具,希望對大家有所幫助,!
一,、細胞死亡的原因及方式
細胞死亡是生命現(xiàn)象不可逆停止及生命的結(jié)束,正常的組織中經(jīng)常發(fā)生細胞死亡,,是維持組織機能和形態(tài)所必須的,,常見的細胞死亡原因及方式主要有以下幾種:
二、細胞凋亡的過程
細胞凋亡是1973年Kerr和Wyllin 先提出這一概念,。細胞凋亡的過程大致可分為以下幾個階段:接受凋亡信號→凋亡調(diào)控分子間的相互作用→蛋白水解酶的活化(Caspase)→進入連續(xù)反應(yīng)過程,。
細胞處于不同的凋亡階段具有不同的生物學(xué)特征,典型的特征包括:1)細胞膜PS(磷脂酰絲氨酸)外翻,;2)線粒體膜電位喪失,;3)細胞核濃縮和斷裂。此外在各個不同的時期:
三,、如何檢測晚期時的細胞特征,?
細胞凋亡是個復(fù)雜的過程,針對凋亡時期不同,,檢測的方法有所不同,,如何檢測晚期時的細胞特征,?
細胞凋亡晚期,染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的作用下,,將脫氧核糖核苷酸和熒光素,、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3'-末端,,從而可進行凋亡細胞的檢測,,這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標記法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂,,因而沒有3'-OH形成,,很少能夠被染色。TUNEL實際上是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法,,對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色,,能準確地反應(yīng)細胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,在細胞凋亡的研究中被廣泛采用,。
四,、細胞凋亡晚期檢測工具
Abbkine的TUNEL法細胞凋亡檢測試劑盒【TUNEL凋亡檢測試劑盒 (綠色熒光),KTA2010,;TUNEL凋亡檢測試劑盒 (橙色熒光),,KTA2011】提供實驗所需的全套試劑組分以及優(yōu)化的實驗方案,適用于熒光酶標儀,、熒光顯微鏡,、流式細胞儀。適用于樣品類型:貼壁細胞,,懸浮細胞,,石蠟包埋組織切片,冰凍切片,。
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