日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

武漢艾美捷科技有限公司
初級會員 | 第6年

13797054889

IP檢測過程中的重,、輕鏈干擾解決方案

時間：2020/1/15閱讀：599
分享：

免疫沉淀 (Immunoprecipitation，IP) 是利用抗原抗體特異性反應(yīng)純化富集目的蛋白的一種方法,?？贵w與細(xì)胞裂解液或表達(dá)上清中相應(yīng)的蛋白結(jié)合后，再與ProteinA/G偶聯(lián)的agarose或Sepharose珠子孵育,，通過離心得到珠子-蛋白A/G-抗體-目的蛋白復(fù)合物,，沉淀經(jīng)過洗滌后，重懸于電泳上樣緩沖液,，煮沸5-10min,，在高溫及還原劑的作用下，抗原與抗體解離,，離心收集上清,，上清中包括抗體、目的蛋白和少量的雜蛋白,。
在免疫沉淀實驗后的WB驗證環(huán)節(jié)中,，當(dāng)使用常規(guī)的 Anti-IgG (H+L) 酶標(biāo)二抗時，通常會出現(xiàn)對應(yīng)免疫沉淀一抗變性后產(chǎn)生的重鏈（50kDa）和輕鏈（25kDa）兩條帶,。如果檢測的目的蛋白分子量在此附近時,，就會受到這兩條帶的干擾。
 

 

如何避免IP檢測過程中的重,、輕鏈干擾，兩種方案可供參考：
方案一：選擇WB一抗時,，選擇和IP用一抗不同的種屬,，避免IP一抗的干擾
山羊抗兔IgG二抗，HRP標(biāo)記,，AMJ-AB2003

方案二：選擇只和重鏈或輕鏈反應(yīng)的二抗

IP™ 山羊抗小鼠IgG輕鏈二抗,，HRP標(biāo)記，AMJ-AB2016
IP™ 山羊抗兔IgG重鏈二抗,，HRP標(biāo)記,，AMJ-AB2019
如果目標(biāo)蛋白分子量小于30KD,，為了避免抗體輕鏈的干擾，選擇重鏈特異性二抗,；如果目標(biāo)蛋白分子量大于30KD,，為了避免抗體重鏈的干擾，選擇輕鏈特異性二抗,。

IP實驗常見問題匯總：

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏,！
標(biāo)簽：
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用：

提示

X
您的留言已提交成功！我們將在第一時間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言