鈣離子濃度研究領(lǐng)域中常使用鈣離子熒光探針與鈣離子的特異性結(jié)合來觀察細胞內(nèi)鈣離子濃度水平的變化，此類探針未結(jié)合Ca2+前幾乎無熒光，結(jié)合Ca2+后,，熒光強度顯著增強,，所顯示光譜可被熒光顯微鏡,、流式細胞術(shù),、熒光光譜法以及熒光酶標(biāo)儀等多種方法檢測。

常用的Ca2+熒光探針根據(jù)波長的不同,，分為兩大類：可見光激發(fā)Ca2+熒光探針和紫外光激發(fā)Ca2+熒光探針

*受歡迎的可見光激發(fā)Ca2+熒光探針：

1）Fluo-3 Fluo-3是*常用的可見光激發(fā)Ca2+熒光探針,，較高的Ca2+結(jié)合力可捕捉細胞內(nèi)Ca2+信號的動力學(xué)變化，使用于多種流式細胞術(shù)相關(guān)實驗,，如籠鎖Ca2+螯合劑光活化,、第二信使、神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)研究以及細胞水平的藥物篩選等,。

2）Fluo-4 Fluo-4是鈣指示劑Fluo-3的升級版本,，主要變化為后者分子上的兩個氯原子被Fluo-4上的氟所取代，該結(jié)構(gòu)上的微小變化使Fluo-4,AM加載更快,，在相同濃度下檢測信號更強,。

3）Rhod-2 Rhod-2是另一種可見光激發(fā)的高親和力Ca2+指示劑,，與其他可見光激發(fā)熒光探針如Fluo-3/4相比,，Rhod-2具有長波長，更適用于檢測具有較高自熒光現(xiàn)象的細胞和組織內(nèi)鈣離子水平以及檢測由光感受器和籠鎖Ca2+螯合劑光激活導(dǎo)致的鈣離子釋放,。

1,，鈣離子熒光探針Rhod-2，貨號：21060

2,，CalbryteTM 590 乙酰氧甲酯,，貨號：20700

3，CalbryteTM 630 乙酰氧甲酯,，貨號：20720

Fura-2和Indo-1均屬紫外激發(fā)Ca2+熒光指示劑,，也是目前*常用的鈣比率測量熒光探針,。Fura-2是雙激發(fā)波長熒光染料，Indo-1是雙發(fā)射波長熒光染料,，均采用比率測量方法,，該方法可以消除不同細胞樣品間熒光探針裝載效率的差異，熒光探針的滲漏,，細胞厚度差異等一些誤差因素,。Fura-2特別適合于數(shù)字成像顯微鏡，使用該設(shè)備可更方便的調(diào)整激發(fā)波長,，使探針結(jié)合鈣離子后在300-400nm的激發(fā)波長范圍內(nèi)掃描Fura-2的吸收偏移,，在510nm處檢測發(fā)射波長。

相比之下,，Indo-1更傾向于流式細胞術(shù)檢測,，使用該設(shè)備可實現(xiàn)在氬離子激光器的351-364光譜范圍內(nèi)單一波長的激發(fā)，在400nm和480nm的波長處分別檢測結(jié)合鈣離子和未結(jié)合鈣離子的熒光信號,，通過二者的比值確定鈣離子的濃度,。Fura-2,AM和Indo-1,AM分別是Fura-2和Indo-1的乙酰氧甲酯（AM）衍生物，具有活細膜滲透性,。

其他鈣離子熒光探針：

腔腸素鈣離子熒光探針和鈣離子熒光探針Cal-500 與常規(guī)的熒光鈣離子指示劑相比,，其主要具有以下幾個優(yōu)點: a.能檢測較大范圍的鈣濃度 – 從0.1 μM至 >100μM； b.樣品無自體熒光,，背景熒光低于使用熒光鈣離子指示劑,；雖然信號比使用熒光鈣離子指示劑弱，但是通過成像儀器可以得到更高的信噪比,，因此具有更高的靈敏度,。 c.水母發(fā)光蛋白復(fù)合體能夠穩(wěn)定維持在細胞內(nèi)，使其能夠進行數(shù)小時至數(shù)天的鈣離子監(jiān)測 與現(xiàn)有的鈣指示劑（如Fluo-3 AM,，F(xiàn)luo-4 AM和Rhod-2 AM）相比,，Calbryte 520，Calbryte 590和Calbryte 630提供*強大的均勻熒光測定工具,，用于檢測細胞內(nèi)鈣動員,。這些鈣敏感染料明顯更亮，并提供更高的信噪比,，大大提高了細胞內(nèi)保留和負載效率,。