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適合用于常規(guī)細(xì)胞原代細(xì)胞以及干細(xì)胞的培養(yǎng)
內(nèi)毒素含量極低 <3EU/ml(規(guī)定：特級(jí)胎牛血清<10 EU/ml)
極利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和傳代 ,，適合各種細(xì)胞培養(yǎng)
七次無(wú)菌過(guò)濾，zui后三次為0.1 µm無(wú)菌過(guò)濾處理
進(jìn)行細(xì)菌,、真菌,、支原體、病毒及病毒抗體檢測(cè),，符合動(dòng)物協(xié)會(huì)要求

細(xì)胞介紹

該細(xì)胞對(duì)乳汁珠和激活的紅細(xì)胞有吞噬作用,，無(wú)表面和胞質(zhì)免疫球蛋白。可以用佛波醇 TPA誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化,。

細(xì)胞特性

1. 來(lái)源：急性單核細(xì)胞白血病,，單核細(xì)胞

2. 形態(tài)：單核細(xì)胞，懸浮 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

【細(xì)胞貨號(hào)】 C5003

【細(xì)胞縮寫】 RAW 264.7細(xì)胞

【細(xì)胞名稱】 RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)

【背景資料】 此細(xì)胞株源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤,。 sIg-, Ia-抗原,、Thy-1.2表面抗原陰性。此細(xì)胞株不分泌可檢測(cè)到的病毒顆粒,，XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性,。 可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖。 可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細(xì)胞,。 LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)分解紅血球但對(duì)腫瘤靶細(xì)胞無(wú)作用,。

【組織來(lái)源】 Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤；單核細(xì)胞,；巨噬細(xì)胞

【細(xì)胞形態(tài)】 不規(guī)則圓形

【細(xì)胞特性】 貼壁

【細(xì)胞活力】 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

【細(xì)胞檢測(cè)】 細(xì)胞不含有HIV-1,、HBV、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌

【培養(yǎng)條件】 詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書

【傳代方法】 建議1:2-1:3 兩天換液一次

【凍存條件】 詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書

【主要文獻(xiàn)】 請(qǐng)具體查閱相關(guān)發(fā)表文章

血清中包含絮狀沉淀，它們是什么,，怎么處理?

沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白,。這是正常特性，不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì),。要除去沉淀,，離心血清(400g，1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里(一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀,，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解,。所以,，使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃，沉淀會(huì)自然消失,。

 如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?

按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：

(1)解凍血清時(shí),，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一,，減少沉淀的發(fā)生,。

(2) 血清分裝凍存時(shí)，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),，使溫度與成分均一,。

(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大,，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,。

(4) 勿將血清置于37℃太久,，否則血清會(huì)變得渾濁,，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì),。

(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,，若非必要，可以無(wú)須做此步驟,。

(6) 若必須做血清的熱滅活,，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則,，并且隨時(shí)搖晃均勻,。溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,，都會(huì)造成沉淀物的增多,。

 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,，可長(zhǎng)期保存嗎?

一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它,。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解,。

 為什么要熱滅活血清?

加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,，刺激平滑肌收縮,，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,。在免疫學(xué) 研究,，培養(yǎng)ES細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞時(shí),，推薦使用熱滅活血清,。

 有必要做熱滅活嗎?

實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或*沒(méi)有任何作用,，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”,，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多,，使研究者誤認(rèn)為是微生物 的分裂擴(kuò)增,。

若非必須，可以不需要做熱處理這一步,。不但節(jié)省時(shí)間,，更確保血清的質(zhì)量!

細(xì)胞培養(yǎng) 中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?

一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先,，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài),，黑點(diǎn)是否游動(dòng),。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃,、變混濁,。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等,。

如果在鏡下觀察細(xì)胞,，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,，沒(méi)有任何變化,，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：

(1)細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老,，破碎的細(xì)胞殘骸;

(2)血清質(zhì)量不好,，反復(fù)凍融的結(jié)果;

(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長(zhǎng);

(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì),、容器不合格,。可應(yīng)用離心,、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn);

(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除,。

 細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?

(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù),。

(2) 培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴。

(3) 培養(yǎng)基保持PH值7.0- 7.2,。

(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),，容器定期刷洗。

(5) 掌握細(xì)胞傳代的時(shí)機(jī),，細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過(guò)老,。

適合用于常規(guī)細(xì)胞原代細(xì)胞的培養(yǎng)
內(nèi)毒素含量極低 <3EU/ml(規(guī)定：特級(jí)胎牛血清<10 EU/ml)
極利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和傳代 ，適合各種細(xì)胞培養(yǎng)
七次無(wú)菌過(guò)濾,，zui后三次為0.1 µm無(wú)菌過(guò)濾處理
進(jìn)行細(xì)菌,、真菌、支原體,、病毒及病毒抗體檢測(cè),，符合動(dòng)物協(xié)會(huì)要求

血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知,，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e,、年齡,、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽,、脂肪,、碳水化合物、生長(zhǎng)因子,、激素,、無(wú)機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的

牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能,。

1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物,。

2. 提供結(jié)合蛋白,，能識(shí)別維生素、脂類,、金屬和其他激素等,，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,，起到解毒作用,。

4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源,。

5.起酸堿度緩沖液作用,。

6.提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,，保護(hù)細(xì)胞不受傷害,。

1、如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,，不透明,，含許多沉淀物，說(shuō)明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性,，若棕紅色,，說(shuō)明血清中的血紅蛋白含量太高，有溶血現(xiàn)象,。

2,、總蛋白含量

胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml，數(shù)值偏高,，說(shuō)明采血的牛齡偏大,，不是胎牛,，數(shù)值偏低，表明血清可能摻水了,。

3,、血紅蛋白

標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl，顏色越紅,，數(shù)值越高,，反之，數(shù)值越低,。

4,、pH

國(guó)產(chǎn)血清，大多高于7.5,，進(jìn)口胎牛血清,，大多低于7.5，具體原因未知,，可能和牛齡有關(guān),，這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。

5,、微生物

包括細(xì)菌,、霉菌、支原體,、噬菌體,、各類病原性病毒等。隨著國(guó)內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,，細(xì)菌,、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制，支原體經(jīng)過(guò)0.1um過(guò)濾,，大多也能清除,。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的，主要是生產(chǎn)環(huán)境過(guò)程中帶入,，又無(wú)法過(guò)濾,，很難*清除，但對(duì)血清質(zhì)量影響不大,。病原性病毒,，特別是BVDV，在國(guó)產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,，這類微生物是影響國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,，而進(jìn)口胎牛血清中基本都控制的很好。

6. 免疫球蛋白

國(guó)產(chǎn)血清的只是定性檢測(cè),，結(jié)果也很不準(zhǔn)確,，進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測(cè),。免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血的時(shí)的牛齡情況,，國(guó)產(chǎn)血清,，基本都是新生牛的，血清中容易產(chǎn)生IgM,，IgG的含量也偏高,，進(jìn)口胎牛血清，不含IgM,，IgG的含量也較低,。

不管是國(guó)產(chǎn)還是進(jìn)口血清，都是不測(cè)抗生素的（無(wú)四環(huán)素胎牛血清除外）,。國(guó)外,，抗生素的使用很嚴(yán)格，用量也很少,，每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國(guó)內(nèi)，抗生素的濫用已成了普遍現(xiàn)象,，國(guó)產(chǎn)血清中殘留很高,，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)極為不利，這是國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因,。

Noverse南美胎牛血清杭州年前一波福利*