Noverse澳洲源胎牛血清開(kāi)學(xué)*

胎牛血清Noverse1500A適用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 適合用于常規(guī)細(xì)胞原代細(xì)胞以及干細(xì)胞的培養(yǎng) 內(nèi)毒素含量極低 <3EU/ml(規(guī)定：特級(jí)胎牛血清<10 EU/ml) 極利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和傳代 ，適合各種細(xì)胞培養(yǎng) 七次無(wú)菌過(guò)濾,，zui后三次為0.1 µm無(wú)菌過(guò)濾處理 進(jìn)行細(xì)菌,、真菌、支原體,、病毒及病毒抗體檢測(cè),，符合動(dòng)物協(xié)會(huì)要求 胎牛血清Noverse1500A適用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 間充質(zhì)干細(xì)胞是特征明確的一類(lèi)成人干細(xì)胞。它們有發(fā)育為成熟細(xì)胞的潛在能力而產(chǎn)生脂肪,、軟骨,、骨骼和肌肉。這些特性與它們發(fā)育中的可塑性共同作用,，使人們對(duì)用間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)替換受損組織的潛在能力產(chǎn)生了極大的興趣,。間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)，在轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子作用下會(huì)分化成軟骨細(xì)胞,。相反,，在有血清、抗壞血酸和地塞米松的作用下會(huì)分化成成骨細(xì)胞,。間充質(zhì)干細(xì)胞有能力更新和分化成多種間充質(zhì)組織,。間充質(zhì)干細(xì)胞有潛能被移植到受損傷的部位或者種植到仿生支架上，生長(zhǎng)形成適當(dāng)?shù)慕M織結(jié)構(gòu),。 　

如何避免血清中產(chǎn)生沉淀? 按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：

(1)解凍血清時(shí),，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一,，減少沉淀的發(fā)生,。

(2) 血清分裝凍存時(shí)，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),，使溫度與成分均一,。

(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大,，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,。

(4) 勿將血清置于37℃太久，否則血清會(huì)變得渾濁,，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,，從而影響血清的品質(zhì)。

(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,，若非必要,，可以無(wú)須做此步驟。

(6) 若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃,，30分鐘的原則,，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,，都會(huì)造成沉淀物的增多。 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,，可長(zhǎng)期保存嗎? 一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí),，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_(kāi)始降解,。 為什么要熱滅活血清? 加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng),。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮,，細(xì)胞和血小板釋放組胺,，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,。在免疫學(xué) 研究,，培養(yǎng)ES細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞時(shí),，推薦使用熱滅活血清,。 有必要做熱滅活嗎? 實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或*沒(méi)有任何作用,，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”,，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多,，使研究者誤認(rèn)為是微生物 的分裂擴(kuò)增,。 若非必須，可以不需要做熱處理這一步,。不但節(jié)省時(shí)間,，更確保血清的質(zhì)量! 細(xì)胞培養(yǎng) 中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理? 一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先,，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,，然后,，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng),。如果細(xì)胞被污染,，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃,、變混濁,。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等,。 如果在鏡下觀察細(xì)胞,，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,，沒(méi)有任何變化,，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：

(1)細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老,，破碎的細(xì)胞殘骸;

(2)血清質(zhì)量不好,，反復(fù)凍融的結(jié)果;

(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長(zhǎng);

(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì),、容器不合格,。可應(yīng)用離心,、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn);

(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除,。

細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?

(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù),。

(2) 培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴。

(3) 培養(yǎng)基保持PH值7.0- 7.2,。

(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),，容器定期刷洗。

(5) 掌握細(xì)胞傳代的時(shí)機(jī),，細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過(guò)老,。

牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),，具有極為重要的功能。

1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。

2. 提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素,、脂類(lèi),、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力,。

3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,，起到解毒作用。

4.是細(xì)胞貼壁,、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源,。

5.起酸堿度緩沖液作用。

6.提供蛋白酶抑制劑,，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。

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