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細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理與技術(shù) 現(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù),、細(xì)胞工程技術(shù),、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù),,而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系,特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展,,細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價值,。
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更新時間:2024/07/29 20:02:01瀏覽次數(shù):765
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Hep 3B2.1-7肝癌細(xì)胞
【背景資料】 見細(xì)胞說明書
【產(chǎn)品來源】 細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ,、ECACC,、RIKEN、promocell,、ScienCell,、ECACC、JCRB,、KCLB,、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)建系
公司提供貼壁,、半貼壁,、懸浮、半懸浮,、貼壁與懸浮混合等細(xì)胞特性,,一般細(xì)胞培養(yǎng)PBS量是10%,如果出現(xiàn)細(xì)胞狀態(tài)不良情況,,可以提高PBS量到15%,,待細(xì)胞穩(wěn)定后,調(diào)回PBS量10%,,對于初次實(shí)驗(yàn)者,,一般細(xì)胞培養(yǎng),都需要加入雙抗防止細(xì)胞污染,,細(xì)胞匯合度達(dá)到90%,,我們開始寄送,這樣可以保持細(xì)胞收到時,良好的細(xì)胞活力,。復(fù)蘇細(xì)胞注意事項(xiàng):
1收到細(xì)胞后當(dāng)天換液,,全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基,放進(jìn)培養(yǎng)箱,,第二天再消化。
2邊觀察邊消化,,根據(jù)細(xì)胞的形態(tài),,終止消化時間,采取以半分鐘間隔吹打細(xì)胞邊緣,,如可吹打下來,,即終止消化??蛻裘鞅容^好的消化時間,。
3隨細(xì)胞有一份細(xì)胞操作說明書,請客戶仔細(xì)查看,。
4記得加1%雙抗,,降低被污染的概率。另外盡早凍存留種,,以備后用,。
5售后時間為一周,僅限于細(xì)胞本身的質(zhì)量問題,,而因乙方自己不當(dāng)操作(不規(guī)范操作,,消化過度,不加雙抗導(dǎo)致的污染等)導(dǎo)致的細(xì)胞問題不在售后范疇,。
6收到細(xì)胞后,,如細(xì)胞狀態(tài)不佳,或培養(yǎng)中遇到問題,,煩請當(dāng)天盡快聯(lián)系,,以便處理。當(dāng)天及時反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),,請您務(wù)必重視,。
7剛收到細(xì)胞時,胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天,,利于細(xì)胞盡快恢復(fù)狀態(tài),,細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,再調(diào)回10%即可,。
Hep 3B2.1-7肝癌細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)三不要:
養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功,。有三個小經(jīng)驗(yàn)可以和大家分享一下:
1. 不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺得這樣可以避免污染,。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑,?知道為什么嗎?燒瓶口燒的,。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系,。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進(jìn)入瓶內(nèi),。塞緊塞子放入冰箱后,,空氣變冷,壓力驟降,,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,,當(dāng)然會變堿,。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢,。(當(dāng)然多多少少還是會有一點(diǎn)越用越堿,,因?yàn)槭覝剡€是比冰箱內(nèi)的溫度高)
其實(shí)燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼,。如果有細(xì)菌的話,這么晃兩下也燒不死多少,。要想燒死全部細(xì)菌,,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口,。來美國以后發(fā)現(xiàn)這里更*,,超凈臺內(nèi)根本就不點(diǎn)酒精燈。
2. 不要頻繁看細(xì)胞,。對于初學(xué)者而言,,養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看,。細(xì)胞越是養(yǎng)不好,,就越是經(jīng)常去看。實(shí)際上看細(xì)胞對細(xì)胞的生長沒有任何好處,,特別是對原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后,,密度特別低的細(xì)胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的,。細(xì)胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長的因子在其周圍,,形成有利于生長的局部環(huán)境,。你跑去看細(xì)胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,,把因子都給晃散了,。經(jīng)常可以看到新手一天到晚都在看細(xì)胞,,細(xì)胞老是長不好,。老手細(xì)胞一扔好幾天不管,細(xì)胞瘋長,。
3. 不要怕消化,。在傳代的時候,初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過度,,早早地終止消化。細(xì)胞沒下來就使勁吹燈,,吹得滿瓶子都是氣泡,。在我看來,用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大,。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,,37度消化過夜,細(xì)胞也沒事,。我一般是等細(xì)胞*變圓后才中止消化,。細(xì)胞輕輕一晃就能下來。還有,,動作要輕柔,,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機(jī)械應(yīng)力相當(dāng)大,,對細(xì)胞的傷害也是很大的,。,公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系,、腫瘤細(xì)胞系,、癌細(xì)胞系(三千多種),提供細(xì)胞株生物體,、生長特性,、來源、器官,、類型,、形態(tài)、培養(yǎng)條件,、應(yīng)用,、系,、疾病、組織,、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息,,我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),能提供細(xì)胞培養(yǎng)*的技術(shù)支持,,讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾,!
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