HCC-2108人肺癌腺癌細胞

一,、規(guī)格：25cm2培養(yǎng)瓶一瓶
特點：細胞代數(shù)為2-3代 
包裝：內(nèi)層無菌自封袋,；防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋,；說明書 
細胞來源：ATCC,、DSMZ、ECACC以及少數(shù)國內(nèi)外大學建系,。 
貨期：1-2周 
運輸方式：快遞運輸 
 

售后：收到人乳腺導管癌細胞,；HCC1500后7天，如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題（如污染,，死亡,，快遞運輸?shù)仍颍r，應出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真或E-mail致銷售人員,，我們將盡快為您解決,。 

二、細胞收到后處理

在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)?好辦法,。收到細胞回到自己的實驗室后,，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),，嚴格無菌操作,。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中,，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液,，懸浮細胞需離心處理，放入37℃,、5%CO2孵箱培養(yǎng),；超過80%匯合度時,，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟,。

三,、細胞培養(yǎng)步驟

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中,，加入約6ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。

 2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

HCC-2108人肺癌腺癌細胞

1,、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

2,、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，進行離心收集,，1000RPM條件下離心5分鐘，去除上清,，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

我公司提供的細胞保證不含不含有細菌,、真菌,、病毒（HIV、HBV,、HCV）,、支原體。