HCC202人乳腺原發(fā)性導(dǎo)管癌細(xì)胞

一,、規(guī)格：25cm2培養(yǎng)瓶一瓶
特點(diǎn)：細(xì)胞代數(shù)為2-3代 
包裝：內(nèi)層無菌自封袋；防壓泡沫盒,；外層防壓保溫氣泡袋,；說明書 
細(xì)胞來源：ATCC、DSMZ,、ECACC以及少數(shù)國內(nèi)外大學(xué)建系,。 
貨期：1-2周 
運(yùn)輸方式：快遞運(yùn)輸 
 

售后：收到人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞；HCC1500后7天,，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染,，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真或E-mail致銷售人員,，我們將盡快為您解決。 

二,、細(xì)胞收到后處理

在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)?好辦法,。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝,，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi),，嚴(yán)格無菌操作。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí),，可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中,，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液，懸浮細(xì)胞需離心處理,，放入37℃,、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí),，根據(jù)情況傳代或者凍存,，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

三、細(xì)胞培養(yǎng)步驟

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

 2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

HCC202人乳腺原發(fā)性導(dǎo)管癌細(xì)胞

1,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

2、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，進(jìn)行離心收集，1000RPM條件下離心5分鐘,，去除上清,，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO,。

我公司提供的細(xì)胞保證不含不含有細(xì)菌,、真菌、病毒（HIV,、HBV,、HCV）、支原體,。