HCC1806人乳腺癌細(xì)胞

一,、規(guī)格：25cm2培養(yǎng)瓶一瓶
特點：細(xì)胞代數(shù)為2-3代 
包裝：內(nèi)層無菌自封袋,；防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋,；說明書 
細(xì)胞來源：ATCC,、DSMZ、ECACC以及少數(shù)國內(nèi)外大學(xué)建系,。 
貨期：1-2周 
運(yùn)輸方式：快遞運(yùn)輸 
 

售后：收到人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞,；HCC1500后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染,，死亡,，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真或E-mail致銷售人員,，我們將盡快為您解決,。 

二、細(xì)胞收到后處理

在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)?好辦法,。收到細(xì)胞回到自己的實驗室后,，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),，嚴(yán)格無菌操作,。鏡下觀察：未超過80%匯合度時,，可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液,，懸浮細(xì)胞需離心處理,，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng),；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存,，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟,。

三、細(xì)胞培養(yǎng)步驟

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

 2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

HCC1806人乳腺癌細(xì)胞 

1、對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

2,、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后,，進(jìn)行離心收集,，1000RPM條件下離心5分鐘，去除上清,，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

我公司提供的細(xì)胞保證不含不含有細(xì)菌,、真菌,、病毒（HIV、HBV,、HCV）,、支原體。