U266B1人外周淋巴細胞

培養(yǎng)條件：89%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%FBS+1%雙抗
凍存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基礎(chǔ)培養(yǎng)液
細胞質(zhì)檢情況：不含細菌、真菌,、支原體等微生物污染
傳代建議：1:2~1:3傳代,，2~3天換液1次
特別提醒：簽收細胞后，如細胞狀態(tài)不佳,，或培養(yǎng)中遇到問題,，煩請當天盡快聯(lián)系，以便處理,。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),，請務(wù)必重視。
 
懸浮細胞接收后的操作流程與注意事項
1.如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室 
2.擰松瓶蓋，細胞瓶豎立培養(yǎng)8h（或過夜）
3.待細胞沉底后吸除上層液體（含碎片殘渣,，請小心操作）,，然后吸取沉底的細胞層（2ML左右轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶，加入新鮮的*培養(yǎng)基（如細胞狀態(tài)較差可將血清濃度調(diào)高到15%）繼續(xù)培養(yǎng)

U266B1人外周淋巴細胞

細胞處理方法：

一,、貼壁細胞
1,、 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細胞生長情況,，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）,。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝。
3,、嚴格遵循無菌操作規(guī)范,，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4,、37度平衡1-2小時,。
5、用移液管吸取培養(yǎng)基,，到50ml離心管中,，剩下細胞密度達到80%至90%可以傳代，如沒有達到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
6,、如果肉眼檢查上清有細胞，對50ml上清進行離心收集細胞,，如果細胞連片狀態(tài),，棄掉上清對收集的細胞進行胰酶消化（1ml胰酶37度）,，接種培養(yǎng)。

二,、懸浮細胞
1,、接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細胞生長情況,，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）,。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝。
3,、嚴格遵循無菌操作規(guī)范,，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4,、細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）,。
5、1000rpm,，5min 離心,，用吸管小心吸出上清，加入培養(yǎng)基,，重懸細胞,。
6、將重懸好的細胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細胞培養(yǎng)瓶種,，加入新鮮培養(yǎng)基,，置于 37℃，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細胞）,。