U14小鼠子宮頸癌細胞

種屬：小鼠
組織來源：宮頸癌
生長特性：懸浮生

形態(tài)特征：上皮樣,；多角

*培養(yǎng)基：RPMI1640,，90%；FBS,，10%（均來自GIBCO 公司）,。

培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide（CO2）長,5%

 傳代方法：一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
凍存方法/凍存液：95%*培養(yǎng)液，5%DMSO
儲存：液氮儲存

形態(tài)特征：上皮樣,；多角

實驗要點及說明 

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法,； 
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,，并經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)*的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。

U14小鼠子宮頸癌細胞

細胞處理方法：

一、貼壁細胞
1,、 接收到細胞,，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況,，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝,。
3、嚴格遵循無菌操作規(guī)范,，打開細胞培養(yǎng)瓶,。
4、37度平衡1-2小時,。
5,、用移液管吸取培養(yǎng)基，到50ml離心管中,，剩下細胞密度達到80%至90%可以傳代,，如沒有達到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
6,、如果肉眼檢查上清有細胞,，對50ml上清進行離心收集細胞,，如果細胞連片狀態(tài),，棄掉上清對收集的細胞進行胰酶消化（1ml胰酶37度），接種培養(yǎng),。

二,、懸浮細胞
1、接收到細胞,，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）,。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。
3,、嚴格遵循無菌操作規(guī)范,，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4,、細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）,。
5、1000rpm,，5min 離心,，用吸管小心吸出上清，加入培養(yǎng)基,，重懸細胞,。
6、將重懸好的細胞轉入六孔板或者細胞培養(yǎng)瓶種,，加入新鮮培養(yǎng)基,，置于 37℃，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細胞）,。