U14小鼠子宮頸癌細(xì)胞

種屬：小鼠
組織來(lái)源：宮頸癌
生長(zhǎng)特性：懸浮生

形態(tài)特征：上皮樣；多角

*培養(yǎng)基：RPMI1640,，90%,；FBS，10%（均來(lái)自GIBCO 公司）,。

培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide（CO2）長(zhǎng),5%

 傳代方法：一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
凍存方法/凍存液：95%*培養(yǎng)液,，5%DMSO
儲(chǔ)存：液氮儲(chǔ)存

形態(tài)特征：上皮樣；多角

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明 

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,； 
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)*的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。

U14小鼠子宮頸癌細(xì)胞

細(xì)胞處理方法：

一,、貼壁細(xì)胞
1、 接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞 100X,200X 各一張）,。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺(tái)內(nèi)打開(kāi)外包裝,。
3,、嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
4,、37度平衡1-2小時(shí)。
5,、用移液管吸取培養(yǎng)基,，到50ml離心管中，剩下細(xì)胞密度達(dá)到80%至90%可以傳代,，如沒(méi)有達(dá)到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
6、如果肉眼檢查上清有細(xì)胞,，對(duì)50ml上清進(jìn)行離心收集細(xì)胞,，如果細(xì)胞連片狀態(tài)，棄掉上清對(duì)收集的細(xì)胞進(jìn)行胰酶消化（1ml胰酶37度）,，接種培養(yǎng),。

二、懸浮細(xì)胞
1,、接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞 100X,200X 各一張）。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺(tái)內(nèi)打開(kāi)外包裝,。
3、嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范,，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4,、細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）,。
5,、1000rpm，5min 離心,，用吸管小心吸出上清,，加入培養(yǎng)基，重懸細(xì)胞,。
6,、將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶種，加入新鮮培養(yǎng)基,，置于 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細(xì)胞）。