TC-71神經(jīng)外胚層腫瘤細(xì)胞

英文名稱(chēng)：Human Neuroectodermal Tumor Cells
1） 來(lái)源：神經(jīng)外胚層
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣,，貼壁生長(zhǎng)
3） 含量：>1x106 個(gè)/mL
4） 污染：支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：

1,、如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,、漏液等情況，請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系我們,。

2,、擰松瓶蓋，細(xì)胞瓶豎立培養(yǎng)8h（或到第二天）

3,、待細(xì)胞沉底后吸除上層液體（含碎片殘?jiān)?，?qǐng)小心操作），然后吸取沉底的細(xì)胞層（2ml左右）轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶,。

4,、加入新鮮的*培養(yǎng)基（如細(xì)胞狀態(tài)較差可將血清濃度調(diào)高到15%）繼續(xù)培養(yǎng),。

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）

1、將培養(yǎng)瓶/皿中的細(xì)胞重懸混勻,。

2,、吸取2/3或者一半混勻后的細(xì)胞懸液到新的培養(yǎng)瓶/皿。

3,、分別在原瓶/皿和新分瓶的培養(yǎng)瓶/皿加入等量或者2倍的新鮮培養(yǎng)基,，使細(xì)胞密度保持5×10（5）/ml左右。

4,、注意培養(yǎng)基PH值變化情況和細(xì)胞密度,，定期半量換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度大于2×10（6）/ml以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存,。

TC-71神經(jīng)外胚層腫瘤細(xì)胞

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,； 
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)*的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。

TC-1小鼠肺上皮細(xì)胞

細(xì)胞處理方法：

一,、貼壁細(xì)胞
1、 接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞 100X,200X 各一張）,。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺(tái)內(nèi)打開(kāi)外包裝,。
3,、嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
4,、37度平衡1-2小時(shí),。
5、用移液管吸取培養(yǎng)基,，到50ml離心管中,，剩下細(xì)胞密度達(dá)到80%至90%可以傳代，如沒(méi)有達(dá)到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
6,、如果肉眼檢查上清有細(xì)胞，對(duì)50ml上清進(jìn)行離心收集細(xì)胞,，如果細(xì)胞連片狀態(tài),，棄掉上清對(duì)收集的細(xì)胞進(jìn)行胰酶消化（1ml胰酶37度），接種培養(yǎng),。

二,、懸浮細(xì)胞
1、接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞 100X,200X 各一張）,。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺(tái)內(nèi)打開(kāi)外包裝,。
3,、嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
4,、細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5,、1000rpm,，5min 離心，用吸管小心吸出上清,，加入培養(yǎng)基,，重懸細(xì)胞。
6,、將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶種,，加入新鮮培養(yǎng)基，置于 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細(xì)胞）,。