TC-1小鼠肺上皮細(xì)胞

細(xì)胞別名：TC-1細(xì)胞,；小鼠肺上皮細(xì)胞 小鼠肺上皮細(xì)胞,；TC-1細(xì)胞

生物安全水平：1

培養(yǎng)基&血清：見培養(yǎng)條件

生物體：小家鼠（小鼠）

來源：器官：肺

細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項：

1、如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,、漏液等情況,，請及時做好照片記錄并聯(lián)系我們。

2,、擰松瓶蓋,，細(xì)胞瓶豎立培養(yǎng)8h（或到第二天）

3、待細(xì)胞沉底后吸除上層液體（含碎片殘渣,，請小心操作）,，然后吸取沉底的細(xì)胞層（2ml左右）轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶。

4,、加入新鮮的*培養(yǎng)基（如細(xì)胞狀態(tài)較差可將血清濃度調(diào)高到15%）繼續(xù)培養(yǎng),。

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴(yán)格遵照無菌操作）

1、將培養(yǎng)瓶/皿中的細(xì)胞重懸混勻,。

2,、吸取2/3或者一半混勻后的細(xì)胞懸液到新的培養(yǎng)瓶/皿,。

3、分別在原瓶/皿和新分瓶的培養(yǎng)瓶/皿加入等量或者2倍的新鮮培養(yǎng)基,，使細(xì)胞密度保持5×10（5）/ml左右,。

4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況和細(xì)胞密度,，定期半量換液（每周2-3次）,，待細(xì)胞密度大于2×10（6）/ml以后重復(fù)1項操作或者凍存。

相關(guān)細(xì)胞資料：

培養(yǎng)條件：GIBCO(1640+10%胎牛血清)

培養(yǎng)環(huán)境：95%空氣,；5%二氧化碳（CO2）

溫度：37.0℃

保存：凍存血清：95%*培養(yǎng)基,；5%二甲基亞砜（DMSO）

儲存溫度：液氮

實驗要點及說明 
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,； 
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)*的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率,； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。

TC-1小鼠肺上皮細(xì)胞

細(xì)胞處理方法：

一,、貼壁細(xì)胞
1、 接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張）,。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝,。
3,、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
4,、37度平衡1-2小時。
5,、用移液管吸取培養(yǎng)基,，到50ml離心管中,，剩下細(xì)胞密度達(dá)到80%至90%可以傳代，如沒有達(dá)到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
6,、如果肉眼檢查上清有細(xì)胞，對50ml上清進(jìn)行離心收集細(xì)胞,，如果細(xì)胞連片狀態(tài),，棄掉上清對收集的細(xì)胞進(jìn)行胰酶消化（1ml胰酶37度），接種培養(yǎng),。

二,、懸浮細(xì)胞
1、接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張）,。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝,。
3,、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
4,、細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5,、1000rpm，5min 離心,，用吸管小心吸出上清,，加入培養(yǎng)基，重懸細(xì)胞,。
6,、將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶種，加入新鮮培養(yǎng)基,，置于 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細(xì)胞）。