T47D人乳腺癌細(xì)胞

復(fù)蘇細(xì)胞注意事項：

1收到細(xì)胞后當(dāng)天換液,，全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基,，放進(jìn)培養(yǎng)箱，第二天再消化,。
2邊觀察邊消化,，根據(jù)細(xì)胞的形態(tài)，終止消化時間,，采取以半分鐘間隔吹打細(xì)胞邊緣,，如可吹打下來,，即終止消化?？蛻裘鞅容^好的消化時間,。
3隨細(xì)胞有一份細(xì)胞操作說明書，請客戶仔細(xì)查看,。
4記得加1%雙抗,，降低被污染的概率,。另外盡早凍存留種,，以備后用。
5售后時間為一周，僅限于細(xì)胞本身的質(zhì)量問題,，而因乙方自己不當(dāng)操作（不規(guī)范操作，消化過度,，不加雙抗導(dǎo)致的污染等）導(dǎo)致的細(xì)胞問題不在售后范疇,。
6收到細(xì)胞后,，如細(xì)胞狀態(tài)不佳，或培養(yǎng)中遇到問題,，煩請當(dāng)天盡快，以便處理,。當(dāng)天及時反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),，請您務(wù)必重視,。
7剛收到細(xì)胞時，胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天,，利于細(xì)胞盡快恢復(fù)狀態(tài),，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后，再調(diào)回10%即可,。
（其中1,2條針對于貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞詳情請見細(xì)胞操作說明書）

T47D人乳腺癌細(xì)胞

細(xì)胞處理方法：

一,、貼壁細(xì)胞
1,、 接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張）,。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝,。
3,、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4,、37度平衡1-2小時,。
5,、用移液管吸取培養(yǎng)基,，到50ml離心管中，剩下細(xì)胞密度達(dá)到80%至90%可以傳代,，如沒有達(dá)到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
6、如果肉眼檢查上清有細(xì)胞,，對50ml上清進(jìn)行離心收集細(xì)胞,，如果細(xì)胞連片狀態(tài)，棄掉上清對收集的細(xì)胞進(jìn)行胰酶消化（1ml胰酶37度）,，接種培養(yǎng),。

二、懸浮細(xì)胞
1,、接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張）。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝,。
3、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
4、細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）,。
5,、1000rpm，5min 離心,，用吸管小心吸出上清,，加入培養(yǎng)基，重懸細(xì)胞,。
6,、將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶種,，加入新鮮培養(yǎng)基,，置于 37℃，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細(xì)胞）,。