T/G HA-VSMC人血管主動脈平滑肌細(xì)胞

細(xì)菌破壁方法:細(xì)菌破壁是成功提取DNA的關(guān)鍵步驟之一,。革蘭氏陽性菌的肽聚糖層構(gòu)成堅韌的三維立體結(jié)構(gòu),而陰性菌肽聚糖層構(gòu)成疏松的二維結(jié)構(gòu),因此不同種類細(xì)菌的破壁方法不同。目前破壁方法有十二烷基磺酸鈉（SDS）裂解法,、溶菌酶法,、反復(fù)凍融法、研磨法,、超聲波法等,。不同細(xì)菌對溶解劑有不同的抗性,溶解細(xì)菌前需先取少量菌懸液,加一定濃度的溶解劑,看是否能溶解菌體。若SDS和溶菌酶均能溶解菌體,使用既廉價又能抑制DNase的SDS;若需用溶菌酶應(yīng)加入SDS促進(jìn)溶菌;如果60℃溶菌過程緩慢,可將溫度提高到70～75℃,，有些菌也可用脫氧膽酸鹽破裂細(xì)胞膜溶解菌體,。對溶解劑有抗性的菌類,可在含青霉素或甘氨酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使其不形成細(xì)胞壁。

T/G HA-VSMC人血管主動脈平滑肌細(xì)胞

發(fā)貨方式：

復(fù)蘇后發(fā)貨：我們復(fù)蘇細(xì)胞后發(fā)貨,，貨期一周左右,，免運費。（氣溫較好建議復(fù)蘇后發(fā)貨）
凍存發(fā)貨(干冰運輸）：需額外增加干冰運費,，選擇干冰運輸?shù)奈覀儼l(fā)兩管細(xì)胞，為了保證客戶接種可靠性多發(fā)一管,。（氣溫低于0℃須凍存發(fā)貨）
細(xì)胞發(fā)貨采取專業(yè)的運輸包裝,，并選擇最快捷的運輸方式（順豐速運或其他空運快遞）

細(xì)胞處理方法：
一、貼壁細(xì)胞
1,、 接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張）。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝,。
3、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
4、37度平衡1-2小時,。
5,、用移液管吸取培養(yǎng)基，到50ml離心管中，剩下細(xì)胞密度達(dá)到80%至90%可以傳代,，如沒有達(dá)到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
6、如果肉眼檢查上清有細(xì)胞,，對50ml上清進(jìn)行離心收集細(xì)胞,，如果細(xì)胞連片狀態(tài)，棄掉上清對收集的細(xì)胞進(jìn)行胰酶消化（1ml胰酶37度）,，接種培養(yǎng),。

二、懸浮細(xì)胞
1,、接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張）。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝,。
3、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
4、細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）,。
5,、1000rpm，5min 離心,，用吸管小心吸出上清,，加入培養(yǎng)基，重懸細(xì)胞,。
6,、將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶種，加入新鮮培養(yǎng)基,，置于 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細(xì)胞）。