SNU-899上呼吸消化道鱗狀細(xì)胞癌

【背景資料】    見細(xì)胞說明書

        【產(chǎn)品來源】    細(xì)胞主要來源ATCC,、DSMZ,、ECACC、RIKEN,、promocell,、ScienCell、ECACC,、JCRB,、KCLB、Asterand,、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)建系

      公司提供貼壁,、半貼壁、懸浮,、半懸浮,、貼壁與懸浮混合等細(xì)胞特性，一般細(xì)胞培養(yǎng)PBS量是10%,，如果出現(xiàn)細(xì)胞狀態(tài)不良情況,，可以提高PBS量到15%，待細(xì)胞穩(wěn)定后,，調(diào)回PBS量10%,，對于初次實驗者,，一般細(xì)胞培養(yǎng)，都需要加入雙抗防止細(xì)胞污染,，細(xì)胞匯合度達到90%,，我們開始寄送，這樣可以保持細(xì)胞收到時,，良好的細(xì)胞活力,。

復(fù)蘇細(xì)胞注意事項：

1收到細(xì)胞后當(dāng)天換液，全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基,，放進培養(yǎng)箱,，第二天再消化。

2邊觀察邊消化,，根據(jù)細(xì)胞的形態(tài),，終止消化時間，采取以半分鐘間隔吹打細(xì)胞邊緣,，如可吹打下來,，即終止消化?？蛻裘鞅容^好的消化時間,。

3隨細(xì)胞有一份細(xì)胞操作說明書，請客戶仔細(xì)查看,。

4記得加1%雙抗,，降低被污染的概率。另外盡早凍存留種,，以備后用,。

5售后時間為一周，僅限于細(xì)胞本身的質(zhì)量問題,，而因乙方自己不當(dāng)操作（不規(guī)范操作,，消化過度，不加雙抗導(dǎo)致的污染等）導(dǎo)致的細(xì)胞問題不在售后范疇,。

6收到細(xì)胞后,，如細(xì)胞狀態(tài)不佳，或培養(yǎng)中遇到問題,，煩請當(dāng)天盡快聯(lián)系,，以便處理。當(dāng)天及時反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),，請您務(wù)必重視,。

7剛收到細(xì)胞時，胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天，利于細(xì)胞盡快恢復(fù)狀態(tài),，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,，再調(diào)回10%即可。

（其中1,2條針對于貼壁細(xì)胞,，懸浮細(xì)胞詳情請見細(xì)胞操作說明書）"    P4

        【產(chǎn)品包裝】    復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）

        【產(chǎn)品規(guī)格】    1*10（6）

        【安全級別】    1

        【產(chǎn)品種屬】    人

        【組織來源】    肝

        【細(xì)胞形態(tài)】    上皮細(xì)胞樣

        【細(xì)胞特性】    貼壁

        "細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇和使用：

MEM：成分簡單，貼壁細(xì)胞,。

DMEM：分高糖型和低糖型,。

IDMEM：適合細(xì)胞密度低，生長困難的細(xì)胞,。如雜交細(xì)胞的篩選,，DNA轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選培養(yǎng)。

RPM1640：應(yīng)用*泛的培養(yǎng)基之一,。懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，主要針對淋巴細(xì)胞，也適合其他細(xì)胞,。

199,、109培養(yǎng)基：成分齊全，培養(yǎng)效果較好,。

F10培養(yǎng)基：適合小鼠及人類二倍體細(xì)胞培養(yǎng),。

F12培養(yǎng)基：適合單細(xì)胞分離培養(yǎng)及無血清培養(yǎng)。

McCoy’s5A培養(yǎng)基：特別適合原代細(xì)胞及較難培養(yǎng)細(xì)胞的生長,。"    95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

        【細(xì)胞檢測】    細(xì)胞不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌

        【培養(yǎng)條件】    詳見細(xì)胞說明書

        【傳代方法】    建議1:2-1:3 兩天換液一次

        【凍存條件】    詳見細(xì)胞說明書

        【主要文獻】    請具體查閱相關(guān)發(fā)表文章

SNU-899上呼吸消化道鱗狀細(xì)胞癌
貼壁細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項
1.收到細(xì)胞當(dāng)天盡快更換新鮮*培養(yǎng)基,，第二天再進行消化處理
2.如果細(xì)胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),，請將懸浮的細(xì)胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察,。同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,，培養(yǎng)觀察
3.若出現(xiàn)生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長,，可將細(xì)胞進行消化,，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)

貼壁細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴(yán)格遵照無菌操作）
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,，加適量0.25%胰酶進行消化細(xì)胞（注意把握消化時間）
2.鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小,，貼壁松動時（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢让?，加6~8ml *培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層,，盡量把細(xì)胞層吹落,，吹散
3.取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,，把細(xì)胞懸液打勻,，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次）,，待細(xì)胞密度達到80%以后重復(fù)1項作或者凍存