SNU387人肝癌細(xì)胞

【背景資料】    見細(xì)胞說(shuō)明書

        【產(chǎn)品來(lái)源】    細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ,、ECACC,、RIKEN、promocell,、ScienCell,、ECACC、JCRB,、KCLB,、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外著名大學(xué)建系

      公司提供貼壁,、半貼壁,、懸浮、半懸浮,、貼壁與懸浮混合等細(xì)胞特性,，一般細(xì)胞培養(yǎng)PBS量是10%,，如果出現(xiàn)細(xì)胞狀態(tài)不良情況，可以提高PBS量到15%,，待細(xì)胞穩(wěn)定后,，調(diào)回PBS量10%，對(duì)于初次實(shí)驗(yàn)者,，一般細(xì)胞培養(yǎng),，都需要加入雙抗防止細(xì)胞污染，細(xì)胞匯合度達(dá)到90%,，我們開始寄送,，這樣可以保持細(xì)胞收到時(shí)，良好的細(xì)胞活力,。

復(fù)蘇細(xì)胞注意事項(xiàng)：

1收到細(xì)胞后當(dāng)天換液,，全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基，放進(jìn)培養(yǎng)箱,，第二天再消化,。

2邊觀察邊消化，根據(jù)細(xì)胞的形態(tài),，終止消化時(shí)間,，采取以半分鐘間隔吹打細(xì)胞邊緣，如可吹打下來(lái),，即終止消化,。客戶摸索比較好的消化時(shí)間,。

3隨細(xì)胞有一份細(xì)胞操作說(shuō)明書,，請(qǐng)客戶仔細(xì)查看。

4記得加1%雙抗,，降低被污染的概率,。另外盡早凍存留種，以備后用,。

5售后時(shí)間為一周,，僅限于細(xì)胞本身的質(zhì)量問(wèn)題，而因乙方自己不當(dāng)操作（不規(guī)范操作,，消化過(guò)度,，不加雙抗導(dǎo)致的污染等）導(dǎo)致的細(xì)胞問(wèn)題不在售后范疇。

6收到細(xì)胞后,，如細(xì)胞狀態(tài)不佳,，或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題，煩請(qǐng)當(dāng)天盡快聯(lián)系，以便處理,。當(dāng)天及時(shí)反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),，請(qǐng)您務(wù)必重視。

7剛收到細(xì)胞時(shí),，胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天,，利于細(xì)胞盡快恢復(fù)狀態(tài)，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,，再調(diào)回10%即可,。

（其中1,2條針對(duì)于貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞詳情請(qǐng)見細(xì)胞操作說(shuō)明書）"    P4

        【產(chǎn)品包裝】    復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）

        【產(chǎn)品規(guī)格】    1*10（6）

        【安全級(jí)別】    1

        【產(chǎn)品種屬】    人

        【組織來(lái)源】    肝

        【細(xì)胞形態(tài)】    上皮細(xì)胞樣

        【細(xì)胞特性】    貼壁

        "細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇和使用：

MEM：成分簡(jiǎn)單,，貼壁細(xì)胞,。

DMEM：分高糖型和低糖型。

IDMEM：適合細(xì)胞密度低,，生長(zhǎng)困難的細(xì)胞,。如雜交細(xì)胞的篩選，DNA轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選培養(yǎng),。

RPM1640：應(yīng)用*泛的培養(yǎng)基之一,。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，主要針對(duì)淋巴細(xì)胞,，也適合其他細(xì)胞,。

199,、109培養(yǎng)基：成分齊全,，培養(yǎng)效果較好。

F10培養(yǎng)基：適合小鼠及人類二倍體細(xì)胞培養(yǎng),。

F12培養(yǎng)基：適合單細(xì)胞分離培養(yǎng)及無(wú)血清培養(yǎng),。

McCoy’s5A培養(yǎng)基：特別適合原代細(xì)胞及較難培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)。"    95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

        【細(xì)胞檢測(cè)】    細(xì)胞不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌

        【培養(yǎng)條件】    詳見細(xì)胞說(shuō)明書

        【傳代方法】    建議1:2-1:3 兩天換液一次

        【凍存條件】    詳見細(xì)胞說(shuō)明書

        【主要文獻(xiàn)】    請(qǐng)具體查閱相關(guān)發(fā)表文章

SNU387人肝癌細(xì)胞
貼壁細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
1.收到細(xì)胞當(dāng)天盡快更換新鮮*培養(yǎng)基，第二天再進(jìn)行消化處理
2.如果細(xì)胞收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,，培養(yǎng)觀察
3.若出現(xiàn)生長(zhǎng)不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞,，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

貼壁細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加適量0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間）
2.鏡下觀察消化情況,，在細(xì)胞邊緣縮小,，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉胰酶,，加6~8ml *培養(yǎng)基,，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落,，吹散
3.取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻,，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)作或者凍存