SNU349人透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌

【細(xì)胞縮寫】SNU349

    【細(xì)胞名稱】SNU349(透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌)

    【背景資料】    見細(xì)胞說明書

    【細(xì)胞消化時(shí)注意把握消化時(shí)間,，消化不夠會(huì)導(dǎo)致吹打細(xì)胞時(shí)造成損傷,，一般消化時(shí)間是2-3分鐘，但以鏡檢時(shí)大部分細(xì)胞縮回球形為準(zhǔn),，一般2次即可將細(xì)胞吹打下來(lái),，消化不夠進(jìn)行細(xì)胞吹打易損傷細(xì)胞。細(xì)胞系的凍存液配方：90%FBS+10%DMSO,，貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化,，重懸打散細(xì)胞,，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)】    細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ,、ECACC,、RIKEN、promocell,、ScienCell,、ECACC,、JCRB、KCLB,、Asterand,、ICLC以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外著名大學(xué)建系

    【代次】    P4

    【規(guī)格】    復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）

    【細(xì)胞數(shù)】    1*10（6）

    【生物安全級(jí)別】    1

    【生物體】    人

    【組織來(lái)源】    胃

    【細(xì)胞形態(tài)】    詳見細(xì)胞說明書部分

    【細(xì)胞特性】    貼壁

    【特別注意：如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng),，貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng),，如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天,；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決】

SNU349人透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌

 發(fā)貨方式：
復(fù)蘇后發(fā)貨：我們復(fù)蘇細(xì)胞后發(fā)貨,，貨期一周左右，免運(yùn)費(fèi),。（氣溫較好建議復(fù)蘇后發(fā)貨）
凍存發(fā)貨(干冰運(yùn)輸）：需額外增加干冰運(yùn)費(fèi),，選擇干冰運(yùn)輸?shù)奈覀儼l(fā)兩管細(xì)胞，為了保證客戶接種可靠性多發(fā)一管,。（氣溫低于0℃須凍存發(fā)貨）
細(xì)胞發(fā)貨采取專業(yè)的運(yùn)輸包裝,，并選擇最快捷的運(yùn)輸方式（順豐速運(yùn)或其他空運(yùn)快遞）

細(xì)胞處理方法：
一、貼壁細(xì)胞
1,、 接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞 100X,200X 各一張）。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺(tái)內(nèi)打開外包裝,。
3、嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范,，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
4、37度平衡1-2小時(shí),。
5,、用移液管吸取培養(yǎng)基，到50ml離心管中，剩下細(xì)胞密度達(dá)到80%至90%可以傳代,，如沒有達(dá)到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
6、如果肉眼檢查上清有細(xì)胞,，對(duì)50ml上清進(jìn)行離心收集細(xì)胞,，如果細(xì)胞連片狀態(tài)，棄掉上清對(duì)收集的細(xì)胞進(jìn)行胰酶消化（1ml胰酶37度）,，接種培養(yǎng),。

二、懸浮細(xì)胞
1,、接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞 100X,200X 各一張）。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺(tái)內(nèi)打開外包裝,。
3、嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范,，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
4、細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）,。
5、1000rpm,，5min 離心,，用吸管小心吸出上清，加入培養(yǎng)基,，重懸細(xì)胞,。
6、將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶種,，加入新鮮培養(yǎng)基,，置于 37℃，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細(xì)胞）,。