SMMC-7721人肝癌細(xì)胞

【背景資料】    見細(xì)胞說明書

        【產(chǎn)品來源】    細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC,、RIKEN,、promocell、ScienCell,、ECACC,、JCRB、KCLB,、Asterand,、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)建系

      公司提供貼壁、半貼壁,、懸浮,、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細(xì)胞特性,，一般細(xì)胞培養(yǎng)PBS量是10%,，如果出現(xiàn)細(xì)胞狀態(tài)不良情況，可以提高PBS量到15%,，待細(xì)胞穩(wěn)定后,，調(diào)回PBS量10%，對于初次實(shí)驗(yàn)者,，一般細(xì)胞培養(yǎng),，都需要加入雙抗防止細(xì)胞污染，細(xì)胞匯合度達(dá)到90%,，我們開始寄送,，這樣可以保持細(xì)胞收到時(shí)，良好的細(xì)胞活力,。

復(fù)蘇細(xì)胞注意事項(xiàng)：

1收到細(xì)胞后當(dāng)天換液,，全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基,，放進(jìn)培養(yǎng)箱，第二天再消化,。

2邊觀察邊消化,，根據(jù)細(xì)胞的形態(tài)，終止消化時(shí)間,，采取以半分鐘間隔吹打細(xì)胞邊緣,，如可吹打下來，即終止消化,?？蛻裘鞅容^好的消化時(shí)間。

3隨細(xì)胞有一份細(xì)胞操作說明書,，請客戶仔細(xì)查看,。

4記得加1%雙抗，降低被污染的概率,。另外盡早凍存留種,，以備后用。

5售后時(shí)間為一周,，僅限于細(xì)胞本身的質(zhì)量問題,，而因乙方自己不當(dāng)操作（不規(guī)范操作，消化過度,，不加雙抗導(dǎo)致的污染等）導(dǎo)致的細(xì)胞問題不在售后范疇,。

6收到細(xì)胞后，如細(xì)胞狀態(tài)不佳,，或培養(yǎng)中遇到問題,，煩請當(dāng)天盡快聯(lián)系，以便處理,。當(dāng)天及時(shí)反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),，請您務(wù)必重視。

7剛收到細(xì)胞時(shí),，胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天,，利于細(xì)胞盡快恢復(fù)狀態(tài)，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,，再調(diào)回10%即可,。

（其中1,2條針對于貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞詳情請見細(xì)胞操作說明書）"    P4

        【產(chǎn)品包裝】    復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）

        【產(chǎn)品規(guī)格】    1*10（6）

        【安全級別】    1

        【產(chǎn)品種屬】    人

        【組織來源】    肝

        【細(xì)胞形態(tài)】    上皮細(xì)胞樣

        【細(xì)胞特性】    貼壁

        "細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇和使用：

MEM：成分簡單,，貼壁細(xì)胞,。

DMEM：分高糖型和低糖型,。

IDMEM：適合細(xì)胞密度低,，生長困難的細(xì)胞,。如雜交細(xì)胞的篩選，DNA轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選培養(yǎng),。

RPM1640：應(yīng)用*泛的培養(yǎng)基之一,。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，主要針對淋巴細(xì)胞,，也適合其他細(xì)胞,。

199、109培養(yǎng)基：成分齊全,，培養(yǎng)效果較好,。

F10培養(yǎng)基：適合小鼠及人類二倍體細(xì)胞培養(yǎng)。

F12培養(yǎng)基：適合單細(xì)胞分離培養(yǎng)及無血清培養(yǎng),。

McCoy’s5A培養(yǎng)基：特別適合原代細(xì)胞及較難培養(yǎng)細(xì)胞的生長,。"    95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

        【細(xì)胞檢測】    細(xì)胞不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌

        【培養(yǎng)條件】    詳見細(xì)胞說明書

        【傳代方法】    建議1:2-1:3 兩天換液一次

        【凍存條件】    詳見細(xì)胞說明書

        【主要文獻(xiàn)】    請具體查閱相關(guān)發(fā)表文章

SMMC-7721人肝癌細(xì)胞
貼壁細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
1.收到細(xì)胞當(dāng)天盡快更換新鮮*培養(yǎng)基,，第二天再進(jìn)行消化處理
2.如果細(xì)胞收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察,。同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基，培養(yǎng)觀察
3.若出現(xiàn)生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,，成島狀生長,，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞,，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

貼壁細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴(yán)格遵照無菌操作）
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加適量0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間）
2.鏡下觀察消化情況,，在細(xì)胞邊緣縮小,，貼壁松動時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉胰酶,，加6~8ml *培養(yǎng)基,，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落,，吹散
3.取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻,，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,，定期換液（每周2-3次）,，待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)作或者凍存