SIRC兔角膜上皮細胞

組織來源：外周血；化學誘變嗜堿性細胞,；白血病

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

背景描述：

AAV-293細胞源自普遍使用的293 [HEK-293]細胞株,，但AAV-293細胞產(chǎn)生的病毒滴度更高。293 [HEK-293]細胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細胞,。跟293 [HEK-293]細胞一樣,，AAV-293細胞反式表達腺病毒E1基因，當共轉(zhuǎn)染三個AAV助質(zhì)粒(一個含ITR的質(zhì)粒,、pAAV-RC和E1缺失助質(zhì)粒)時,，AAV-293細胞可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒,；因此，我們推薦使用AAV-293細胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒,。

生長培養(yǎng)基：MEM(貨號:PM150410)＋15% heat-inactivated FBS＋1% P/S(貨號:PB180120)

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

溫度：37℃

SIRC兔角膜上皮細胞

 發(fā)貨方式：
復(fù)蘇后發(fā)貨：我們復(fù)蘇細胞后發(fā)貨,，貨期一周左右，免運費,。（氣溫較好建議復(fù)蘇后發(fā)貨）
凍存發(fā)貨(干冰運輸）：需額外增加干冰運費,，選擇干冰運輸?shù)奈覀儼l(fā)兩管細胞，為了保證客戶接種可靠性多發(fā)一管,。（氣溫低于0℃須凍存發(fā)貨）
細胞發(fā)貨采取專業(yè)的運輸包裝,，并選擇最快捷的運輸方式（順豐速運或其他空運快遞）

細胞處理方法：
一、貼壁細胞
1,、 接收到細胞,，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況,，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝,。
3、嚴格遵循無菌操作規(guī)范,，打開細胞培養(yǎng)瓶,。
4、37度平衡1-2小時,。
5,、用移液管吸取培養(yǎng)基，到50ml離心管中,，剩下細胞密度達到80%至90%可以傳代,，如沒有達到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
6,、如果肉眼檢查上清有細胞,，對50ml上清進行離心收集細胞，如果細胞連片狀態(tài),，棄掉上清對收集的細胞進行胰酶消化（1ml胰酶37度）,，接種培養(yǎng)。

二,、懸浮細胞
1,、接收到細胞,，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況,，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝,。
3、嚴格遵循無菌操作規(guī)范,，打開細胞培養(yǎng)瓶,。
4、細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）,。
5,、1000rpm，5min 離心,，用吸管小心吸出上清,，加入培養(yǎng)基，重懸細胞,。
6,、將重懸好的細胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細胞培養(yǎng)瓶種，加入新鮮培養(yǎng)基,，置于 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細胞）。