SIRC兔角膜上皮細(xì)胞

組織來源：外周血,；化學(xué)誘變嗜堿性細(xì)胞；白血病

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

背景描述：

AAV-293細(xì)胞源自普遍使用的293 [HEK-293]細(xì)胞株,，但AAV-293細(xì)胞產(chǎn)生的病毒滴度更高,。293 [HEK-293]細(xì)胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞。跟293 [HEK-293]細(xì)胞一樣，AAV-293細(xì)胞反式表達(dá)腺病毒E1基因,，當(dāng)共轉(zhuǎn)染三個AAV助質(zhì)粒(一個含ITR的質(zhì)粒,、pAAV-RC和E1缺失助質(zhì)粒)時，AAV-293細(xì)胞可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒,；因此,，我們推薦使用AAV-293細(xì)胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。

生長培養(yǎng)基：MEM(貨號:PM150410)＋15% heat-inactivated FBS＋1% P/S(貨號:PB180120)

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

溫度：37℃

SIRC兔角膜上皮細(xì)胞

 發(fā)貨方式：
復(fù)蘇后發(fā)貨：我們復(fù)蘇細(xì)胞后發(fā)貨,，貨期一周左右,，免運(yùn)費。（氣溫較好建議復(fù)蘇后發(fā)貨）
凍存發(fā)貨(干冰運(yùn)輸）：需額外增加干冰運(yùn)費,，選擇干冰運(yùn)輸?shù)奈覀儼l(fā)兩管細(xì)胞,，為了保證客戶接種可靠性多發(fā)一管。（氣溫低于0℃須凍存發(fā)貨）
細(xì)胞發(fā)貨采取專業(yè)的運(yùn)輸包裝,，并選擇最快捷的運(yùn)輸方式（順豐速運(yùn)或其他空運(yùn)快遞）

細(xì)胞處理方法：
一,、貼壁細(xì)胞
1、 接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張）。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝,。
3,、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
4,、37度平衡1-2小時。
5,、用移液管吸取培養(yǎng)基,，到50ml離心管中，剩下細(xì)胞密度達(dá)到80%至90%可以傳代,，如沒有達(dá)到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
6、如果肉眼檢查上清有細(xì)胞,，對50ml上清進(jìn)行離心收集細(xì)胞,，如果細(xì)胞連片狀態(tài),，棄掉上清對收集的細(xì)胞進(jìn)行胰酶消化（1ml胰酶37度），接種培養(yǎng),。

二,、懸浮細(xì)胞
1、接收到細(xì)胞,，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張）。
2,、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝,。
3、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
4、細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）,。
5,、1000rpm，5min 離心,，用吸管小心吸出上清,，加入培養(yǎng)基，重懸細(xì)胞,。
6,、將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶種，加入新鮮培養(yǎng)基,，置于 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細(xì)胞）。