MEF小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁

培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%FBS

規(guī)格：>5×105ml

產(chǎn)品應(yīng)用：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究,。

特點(diǎn)：細(xì)胞代數(shù)為4-5代左右,。

細(xì)胞特征：每?jī)傻饺爝M(jìn)行換液。細(xì)胞應(yīng)當(dāng)在融合前傳代

冷凍保存方法：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。

用途：本產(chǎn)品只提供給進(jìn)一步的科研使用,，不可應(yīng)用于治療等其他方面。

    【特別注意：如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),，建議添加雙抗培養(yǎng),，貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng),，如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天,。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決】

MEF小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)三不要：
養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個(gè)小經(jīng)驗(yàn)可以和大家分享一下：
1. 不要燒瓶口,。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,，覺(jué)得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑,？知道為什么嗎,？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系,。瓶口在火焰上的時(shí)候,，熾熱的空氣進(jìn)入瓶?jī)?nèi),。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷,，壓力驟降,，培養(yǎng)基中的碳酸就會(huì)轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來(lái),。培養(yǎng)基中的碳酸少了,，當(dāng)然會(huì)變堿。如果不燒瓶口的話,，你會(huì)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會(huì)大大減慢,。（當(dāng)然多多少少還是會(huì)有一點(diǎn)越用越堿，因?yàn)槭覝剡€是比冰箱內(nèi)的溫度高）
其實(shí)燒瓶口防止污染純粹是心理安慰,。不妨試一下把手指在火上晃幾下,，你會(huì)發(fā)現(xiàn)根本就不會(huì)燒疼。如果有細(xì)菌的話,，這么晃兩下也燒不死多少,。要想燒死全部細(xì)菌，除非把瓶口和塞子燒紅,。我在國(guó)內(nèi)從來(lái)就不燒瓶口,。來(lái)美國(guó)以后發(fā)現(xiàn)這里更*，超凈臺(tái)內(nèi)根本就不點(diǎn)酒精燈,。
2. 不要頻繁看細(xì)胞,。對(duì)于初學(xué)者而言，養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣,，有空就要去看看,。細(xì)胞越是養(yǎng)不好，就越是經(jīng)常去看,。實(shí)際上看細(xì)胞對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有任何好處,，細(xì)胞系特別是對(duì)原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細(xì)胞,。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)因子是非常有限的,。細(xì)胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長(zhǎng)的因子在其周圍，形成有利于生長(zhǎng)的局部環(huán)境,。你跑去看細(xì)胞,，培養(yǎng)瓶這么一晃，把因子都給晃散了,。經(jīng)?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇?xì)胞，細(xì)胞老是長(zhǎng)不好,。老手細(xì)胞一扔好幾天不管,，細(xì)胞瘋長(zhǎng),。
3. 不要怕消化。在傳代的時(shí)候,，初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過(guò)度,，早早地終止消化。細(xì)胞沒(méi)下來(lái)就使勁吹燈,，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來(lái),，用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大,。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r(shí)候，37度消化過(guò)夜,，細(xì)胞也沒(méi)事,。我一般是等細(xì)胞*變圓后才中止消化。細(xì)胞輕輕一晃就能下來(lái),。還有,，動(dòng)作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡,。應(yīng)力相當(dāng)大,，對(duì)細(xì)胞的傷害也是很大的。