MDA-MB-231-GFP人乳腺癌細胞-綠色標記

細胞來源：人乳腺癌

生長狀態(tài)： 貼壁生長

細胞形態(tài)：上皮樣

培養(yǎng)基：RPMI-1640 90%,，F(xiàn)etal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件：37℃ 5% CO2

消化條件：0.25% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA 溶液，消化 5-10min

消化比例：1：3-1：6

換液時間：2-3 天換液一次

凍存液比例：85%培養(yǎng)基,，10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度：1-3 ×10^6/管,，液氮保存

規(guī)格：70%-80%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶

特點：細胞代數(shù)為3-5代左右

包裝：內層無菌自封袋；防壓泡沫盒,；外層防壓保溫氣泡袋,；說明書

細胞來源：ATCC

貨期：1-2周

運輸方式：快遞運輸

售后：收到細胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細胞有質量問題（如污染,，死亡,，快遞運輸?shù)仍颍r，應出具書面質量問題報告并及時傳真或致銷售人員,，我們將盡快為您解決,。

接受后處理

1) 收到細胞后，請檢查是否漏液 ,，如果漏液,，請拍照片發(fā)給我們。

 2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài),，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。

 3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基,。

 4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。

 5) 接到細胞次日,，請檢查細胞是 否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們取得聯(lián)系,。

MDA-MB-231-GFP人乳腺癌細胞-綠色標記

   "購買細胞注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。

2. 仔細閱讀細胞說明書，細胞了解細胞相關信息如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子等,。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜,，隔天再取出觀察,。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,，如果證實細胞活力正常,，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活力,，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次,。

4. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通交流

細胞培養(yǎng)三不要：

養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功,。有三個小經驗可以和大家分享一下：

1. 不要燒瓶口,。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子，覺得這樣可以避免污染,。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑,？知道為什么嗎？燒瓶口燒的,。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系,。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內,。塞緊塞子放入冰箱后,，空氣變冷，壓力驟降,，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉化成二氧化碳,，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,，當然會變堿,。如果不燒瓶口的話，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢,。（當然多多少少還是會有一點越用越堿,，因為室溫還是比冰箱內的溫度高）

其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼,。如果有細菌的話，這么晃兩下也燒不死多少,。要想燒死全部細菌,，除非把瓶口和塞子燒紅,。我在國內從來就不燒瓶口。來美國以后發(fā)現(xiàn)這里更*,，超凈臺內根本就不點酒精燈,。

2. 不要頻繁看細胞。對于初學者而言,，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,，有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好,，就越是經常去看,。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處，細胞特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,，密度特別低的細胞,。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,，形成有利于生長的局部環(huán)境,。你跑去看細胞，培養(yǎng)瓶這么一晃,，把因子都給晃散了,。經常可以看到新手一天到晚都在看細胞,，細胞老是長不好,。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長,。

3. 不要怕消化,。在傳代的時候，初學者往往生怕細胞消化過度,，早早地終止消化,。細胞沒下來就使勁吹燈，吹得滿瓶子都是氣泡,。在我看來,，用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,，37度消化過夜,，細胞也沒事。我一般是等細胞*變圓后才中止消化,。細胞輕輕一晃就能下來,。還有，動作要輕柔,，盡量不要產生氣泡,。

應力相當大,，對細胞的傷害也是很大的。"    詳見細胞說明書

    傳代方法：    建議1:2-1:3 兩天換液一次

    凍存條件：    詳見細胞說明書

    主要文獻：    請具體查閱相關發(fā)表文章

細胞培養(yǎng)三不要：

養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功,。有三個小經驗可以和大家分享一下：
1. 不要燒瓶口,。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子，覺得這樣可以避免污染,。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑,？知道為什么嗎？燒瓶口燒的,。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系,。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內,。塞緊塞子放入冰箱后,，空氣變冷，壓力驟降,，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉化成二氧化碳,，釋放出來,。培養(yǎng)基中的碳酸少了,，當然會變堿。如果不燒瓶口的話,，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢,。（當然多多少少還是會有一點越用越堿，因為室溫還是比冰箱內的溫度高）
其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰,。不妨試一下把手指在火上晃幾下,，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話,，這么晃兩下也燒不死多少,。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅,。我在國內從來就不燒瓶口,。來美國以后發(fā)現(xiàn)這里更*，超凈臺內根本就不點酒精燈,。
2. 不要頻繁看細胞,。對于初學者而言，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,，有空就要去看看,。細胞越是養(yǎng)不好，就越是經常去看,。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,，細胞系特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,，密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的,。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,，形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞,，培養(yǎng)瓶這么一晃,，把因子都給晃散了。經?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?，細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,，細胞瘋長,。
3. 不要怕消化。在傳代的時候,，初學者往往生怕細胞消化過度,，早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,，吹得滿瓶子都是氣泡,。在我看來，用力吹打對細胞的損傷比消化更大,。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,，37度消化過夜，細胞也沒事,。我一般是等細胞*變圓后才中止消化,。細胞輕輕一晃就能下來。還有,，動作要輕柔,，盡量不要產生氣泡。應力相當大,，對細胞的傷害也是很大的,。