MB49小鼠膀胱癌細胞

1） 來源：小鼠膀胱癌

2） 形態(tài)：上皮細胞樣

3） 含量：>1x106 個/mL

4） 污染：支原體,、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規(guī)格：T75瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存：使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞,。收到細胞后,，可在1000RPM，常溫條件下,，離心5min后,，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟,。

細胞用途：僅供科研使用,。

    【特別注意：如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng),，貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng),，如果細胞為貼壁細胞,，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心,，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天,；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決】

MB49小鼠膀胱癌細胞

細胞培養(yǎng)三不要：
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功,。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下：
1. 不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,，覺得這樣可以避免污染,。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎,？燒瓶口燒的,。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系,。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內(nèi),。塞緊塞子放入冰箱后,，空氣變冷，壓力驟降,，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,，當然會變堿,。如果不燒瓶口的話，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢,。（當然多多少少還是會有一點越用越堿,，因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高）
其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼,。如果有細菌的話，這么晃兩下也燒不死多少,。要想燒死全部細菌,，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口,。來美國以后發(fā)現(xiàn)這里更*,，超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈。
2. 不要頻繁看細胞,。對于初學者而言,，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣，有空就要去看看,。細胞越是養(yǎng)不好,，就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,，細胞系特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,，密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的,。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,，形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞,，培養(yǎng)瓶這么一晃,，把因子都給晃散了。經(jīng)常可以看到新手一天到晚都在看細胞,，細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,，細胞瘋長,。
3. 不要怕消化。在傳代的時候,，初學者往往生怕細胞消化過度,，早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,，吹得滿瓶子都是氣泡,。在我看來，用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大,。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,，37度消化過夜，細胞也沒事,。我一般是等細胞*變圓后才中止消化,。細胞輕輕一晃就能下來。還有,，動作要輕柔,，盡量不要產(chǎn)生氣泡。應力相當大,，對細胞的傷害也是很大的,。