L02人正常肝細(xì)胞

特點(diǎn)和簡(jiǎn)介

L-02細(xì)胞建系鑒定于1980年,。該細(xì)胞是一株正常肝細(xì)胞系，具有典型的肝細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征,，可用于多種實(shí)驗(yàn)研究,。

接受后處理

1) 收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液 ,，如果漏液,，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。

 2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng) 狀態(tài),，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。

 3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基,。

 4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。

 5) 接到細(xì)胞次日,，請(qǐng)檢查細(xì)胞是 否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系,。
 

L02人正常肝細(xì)胞

   "購(gòu)買細(xì)胞注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，細(xì)胞了解細(xì)胞相關(guān)信息如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子等,。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,，隔天再取出觀察,。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系,，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通交流

細(xì)胞培養(yǎng)三不要：

養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個(gè)小經(jīng)驗(yàn)可以和大家分享一下：

1. 不要燒瓶口,。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,，覺(jué)得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑,？知道為什么嗎,？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系,。瓶口在火焰上的時(shí)候,，熾熱的空氣進(jìn)入瓶?jī)?nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,，空氣變冷,，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會(huì)轉(zhuǎn)化成二氧化碳,，釋放出來(lái),。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當(dāng)然會(huì)變堿,。如果不燒瓶口的話,，你會(huì)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會(huì)大大減慢。（當(dāng)然多多少少還是會(huì)有一點(diǎn)越用越堿,，因?yàn)槭覝剡€是比冰箱內(nèi)的溫度高）

其實(shí)燒瓶口防止污染純粹是心理安慰,。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會(huì)發(fā)現(xiàn)根本就不會(huì)燒疼,。如果有細(xì)菌的話,，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細(xì)菌,，除非把瓶口和塞子燒紅,。我在國(guó)內(nèi)從來(lái)就不燒瓶口,。來(lái)美國(guó)以后發(fā)現(xiàn)這里更*，超凈臺(tái)內(nèi)根本就不點(diǎn)酒精燈,。

2. 不要頻繁看細(xì)胞,。對(duì)于初學(xué)者而言，養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣,，有空就要去看看,。細(xì)胞越是養(yǎng)不好，就越是經(jīng)常去看,。實(shí)際上看細(xì)胞對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有任何好處，細(xì)胞特別是對(duì)原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后,，密度特別低的細(xì)胞,。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)因子是非常有限的。細(xì)胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長(zhǎng)的因子在其周圍,，形成有利于生長(zhǎng)的局部環(huán)境,。你跑去看細(xì)胞，培養(yǎng)瓶這么一晃,，把因子都給晃散了,。經(jīng)常可以看到新手一天到晚都在看細(xì)胞,，細(xì)胞老是長(zhǎng)不好,。老手細(xì)胞一扔好幾天不管，細(xì)胞瘋長(zhǎng),。

3. 不要怕消化,。在傳代的時(shí)候，初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過(guò)度,，早早地終止消化,。細(xì)胞沒(méi)下來(lái)就使勁吹燈，吹得滿瓶子都是氣泡,。在我看來(lái),，用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r(shí)候,，37度消化過(guò)夜,，細(xì)胞也沒(méi)事。我一般是等細(xì)胞*變圓后才中止消化,。細(xì)胞輕輕一晃就能下來(lái),。還有，動(dòng)作要輕柔,，盡量不要產(chǎn)生氣泡,。

應(yīng)力相當(dāng)大,，對(duì)細(xì)胞的傷害也是很大的。"    詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書

    傳代方法：    建議1:2-1:3 兩天換液一次

    凍存條件：    詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書

    主要文獻(xiàn)：    請(qǐng)具體查閱相關(guān)發(fā)表文章

細(xì)胞培養(yǎng)三不要：

養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功,。有三個(gè)小經(jīng)驗(yàn)可以和大家分享一下：
1. 不要燒瓶口,。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子，覺(jué)得這樣可以避免污染,。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑,？知道為什么嗎？燒瓶口燒的,。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系,。瓶口在火焰上的時(shí)候，熾熱的空氣進(jìn)入瓶?jī)?nèi),。塞緊塞子放入冰箱后,，空氣變冷，壓力驟降,，培養(yǎng)基中的碳酸就會(huì)轉(zhuǎn)化成二氧化碳,，釋放出來(lái)。培養(yǎng)基中的碳酸少了,，當(dāng)然會(huì)變堿,。如果不燒瓶口的話，你會(huì)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會(huì)大大減慢,。（當(dāng)然多多少少還是會(huì)有一點(diǎn)越用越堿,，因?yàn)槭覝剡€是比冰箱內(nèi)的溫度高）
其實(shí)燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,，你會(huì)發(fā)現(xiàn)根本就不會(huì)燒疼,。如果有細(xì)菌的話，這么晃兩下也燒不死多少,。要想燒死全部細(xì)菌,，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國(guó)內(nèi)從來(lái)就不燒瓶口,。來(lái)美國(guó)以后發(fā)現(xiàn)這里更*,，超凈臺(tái)內(nèi)根本就不點(diǎn)酒精燈。
2. 不要頻繁看細(xì)胞,。對(duì)于初學(xué)者而言,，養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣，有空就要去看看,。細(xì)胞越是養(yǎng)不好,，就越是經(jīng)常去看。實(shí)際上看細(xì)胞對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有任何好處，細(xì)胞系特別是對(duì)原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后,，密度特別低的細(xì)胞,。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)因子是非常有限的,。細(xì)胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長(zhǎng)的因子在其周圍,，形成有利于生長(zhǎng)的局部環(huán)境,。你跑去看細(xì)胞,，培養(yǎng)瓶這么一晃，把因子都給晃散了,。經(jīng)?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇?xì)胞,，細(xì)胞老是長(zhǎng)不好,。老手細(xì)胞一扔好幾天不管,，細(xì)胞瘋長(zhǎng)。
3. 不要怕消化,。在傳代的時(shí)候,，初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過(guò)度，早早地終止消化,。細(xì)胞沒(méi)下來(lái)就使勁吹燈,，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來(lái),，用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大,。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r(shí)候，37度消化過(guò)夜,，細(xì)胞也沒(méi)事,。我一般是等細(xì)胞*變圓后才中止消化,。細(xì)胞輕輕一晃就能下來(lái)。還有,，動(dòng)作要輕柔,，盡量不要產(chǎn)生氣泡。應(yīng)力相當(dāng)大,，對(duì)細(xì)胞的傷害也是很大的,。