K7M2wt小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞

細(xì)胞縮寫： K7M2 wt細(xì)胞

細(xì)胞名稱： K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞)

詳細(xì)背景： 抗原表達: CD31 陽性 [PubMed:1315100] 產(chǎn)物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表達顯示其骨家族細(xì)胞特性。 

細(xì)胞來源： 細(xì)胞主要來源ATCC,、DSMZ,、ECACC、RIKEN,、promocell,、ScienCell,、ECACC、JCRB,、KCLB,、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)建系

       提供貼壁,、半貼壁,、懸浮、半懸浮,、貼壁與懸浮混合等細(xì)胞特性,，一般細(xì)胞培養(yǎng)PBS量是10%，如果出現(xiàn)細(xì)胞狀態(tài)不良情況,，可以提高PBS量到15%,，待細(xì)胞穩(wěn)定后，調(diào)回PBS量10%,，對于初次實驗者,，一般細(xì)胞培養(yǎng)，都需要加入雙抗防止細(xì)胞污染,，細(xì)胞匯合度達到90%,，我們開始寄送，這樣可以保持細(xì)胞收到時,，良好的細(xì)胞活力,。復(fù)蘇細(xì)胞注意事項：

1收到細(xì)胞后當(dāng)天換液，全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基,，放進培養(yǎng)箱,，第二天再消化。

2邊觀察邊消化,，根據(jù)細(xì)胞的形態(tài),，終止消化時間，采取以半分鐘間隔吹打細(xì)胞邊緣,，如可吹打下來,，即終止消化?？蛻裘鞅容^好的消化時間,。

3隨細(xì)胞有一份細(xì)胞操作說明書，請客戶仔細(xì)查看,。

4記得加1%雙抗,，降低被污染的概率。另外盡早凍存留種,，以備后用,。

5售后時間為一周,，僅限于細(xì)胞本身的質(zhì)量問題，而因乙方自己不當(dāng)操作（不規(guī)范操作,，消化過度,，不加雙抗導(dǎo)致的污染等）導(dǎo)致的細(xì)胞問題不在售后范疇。

6收到細(xì)胞后,，如細(xì)胞狀態(tài)不佳,，或培養(yǎng)中遇到問題，煩請當(dāng)天盡快聯(lián)系,，以便處理,。當(dāng)天及時反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù)，請您務(wù)必重視,。

7剛收到細(xì)胞時,，胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天，利于細(xì)胞盡快恢復(fù)狀態(tài),，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,，再調(diào)回10%即可。

      【細(xì)胞】    細(xì)胞不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌

        【培養(yǎng)條件】    詳見細(xì)胞說明書

        【傳代方法】    建議1:2-1:3 兩天換液一次

        【凍存條件】    詳見細(xì)胞說明書

        【主要文獻】    請具體查閱相關(guān)發(fā)表文章

K7M2wt小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)三不要：
養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下：
1. 不要燒瓶口,。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑,？知道為什么嗎,？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系,。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內(nèi),。塞緊塞子放入冰箱后,，空氣變冷，壓力驟降,，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,，當(dāng)然會變堿,。如果不燒瓶口的話,，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。（當(dāng)然多多少少還是會有一點越用越堿,，因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高）
其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰,。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼,。如果有細(xì)菌的話,，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細(xì)菌,，除非把瓶口和塞子燒紅,。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來美國以后發(fā)現(xiàn)這里更*,，超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈,。
2. 不要頻繁看細(xì)胞。對于初學(xué)者而言,，養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣,，有空就要去看看。細(xì)胞越是養(yǎng)不好,，就越是經(jīng)常去看,。實際上看細(xì)胞對細(xì)胞的生長沒有任何好處，細(xì)胞系特別是對原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后,，密度特別低的細(xì)胞,。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細(xì)胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,，形成有利于生長的局部環(huán)境,。你跑去看細(xì)胞，培養(yǎng)瓶這么一晃,，把因子都給晃散了,。經(jīng)常可以看到新手一天到晚都在看細(xì)胞,，細(xì)胞老是長不好,。老手細(xì)胞一扔好幾天不管，細(xì)胞瘋長,。
3. 不要怕消化,。在傳代的時候，初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過度,，早早地終止消化,。細(xì)胞沒下來就使勁吹燈，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,，用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大,。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候，37度消化過夜,，細(xì)胞也沒事,。我一般是等細(xì)胞*變圓后才中止消化。細(xì)胞輕輕一晃就能下來,。還有,，動作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡,。應(yīng)力相當(dāng)大,，對細(xì)胞的傷害也是很大的。