供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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更新時間:2024/07/28 19:09:22瀏覽次數(shù):778
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J774A.1小鼠單核巨噬細(xì)胞
細(xì)胞包裝:T25培養(yǎng)瓶/凍存管
細(xì)胞運(yùn)輸:常溫/干冰包裝低溫
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細(xì)胞培養(yǎng)三不要:
養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功,。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下:
1. 不要燒瓶口,。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺得這樣可以避免污染,。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑,?知道為什么嗎?燒瓶口燒的,。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系,。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進(jìn)入瓶內(nèi),。塞緊塞子放入冰箱后,,空氣變冷,壓力驟降,,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,,當(dāng)然會變堿,。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢,。(當(dāng)然多多少少還是會有一點越用越堿,,因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)
其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼,。如果有細(xì)菌的話,這么晃兩下也燒不死多少,。要想燒死全部細(xì)菌,,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口,。來美國以后發(fā)現(xiàn)這里更*,,超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈。
2. 不要頻繁看細(xì)胞,。對于初學(xué)者而言,,養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看,。細(xì)胞越是養(yǎng)不好,,就越是經(jīng)常去看。實際上看細(xì)胞對細(xì)胞的生長沒有任何好處,,細(xì)胞系特別是對原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后,,密度特別低的細(xì)胞,。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細(xì)胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,,形成有利于生長的局部環(huán)境,。你跑去看細(xì)胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,,把因子都給晃散了,。經(jīng)常可以看到新手一天到晚都在看細(xì)胞,,細(xì)胞老是長不好,。老手細(xì)胞一扔好幾天不管,細(xì)胞瘋長,。
3. 不要怕消化,。在傳代的時候,初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過度,,早早地終止消化,。細(xì)胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡,。在我看來,,用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,,37度消化過夜,,細(xì)胞也沒事。我一般是等細(xì)胞*變圓后才中止消化,。細(xì)胞輕輕一晃就能下來,。還有,動作要輕柔,,盡量不要產(chǎn)生氣泡。應(yīng)力相當(dāng)大,,對細(xì)胞的傷害也是很大的,。
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